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1、安徽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文AtCBF基因和ThNHX1基因的克隆和無選擇標記植物表達載體的構(gòu)建姓名：張春平申請學位級別：碩士專業(yè)：生態(tài)學指導教師：束良佐南京曉蔡小寧201106pCAMBIA1301Rd29ACBF3并通過凍融法將該重組質(zhì)粒成功地導入根癌農(nóng)桿菌菌株LBA4404中。3.根據(jù)鹽芥的序列設(shè)計引物，通過RTPCR方法從植物鹽芥中克隆出相關(guān)耐鹽基因ThNHX1?？寺〉腡hNHX1基因長1761bp，運用NCBI的FFinder查詢
2、軟件得出最長編碼區(qū)1635bp，編碼545個氨基酸，與已知的擬南芥的NaH逆向轉(zhuǎn)運蛋白（GenBank登記號：NM_122597）具有94.4%的相似性，和其他植物的NaH逆向轉(zhuǎn)運蛋白也有比較高的相似性。4.采用常規(guī)分子克隆技術(shù)，成功的剔除雙元植物表達載體pCAMBIA1301中的篩選標記基因，并成功剔除其中的潮霉素篩選標記基因，構(gòu)建了無篩選標記基因的植物表達載體pCAMBIA1301NOhyg。并利用已克隆好的PMD18TCBF3與P
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