調(diào)控Nampt在糖尿病腎病炎癥-纖維化中對波形蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討內(nèi)源性煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（endogenous Nampt）在糖尿病模型小鼠腎小球纖維化(glomerular fibrosis，GF)中對波形蛋白(Vimentin， VIM)表達(dá)的影響。
　　方法：應(yīng)用糖尿病動物模型，制備腎臟組織切片，應(yīng)用免疫共聚焦和免疫熒光進(jìn)行蛋白表達(dá)的定位分析，分別評價腎臟腎小球細(xì)胞中Nampt和VIM的表達(dá)情況；根據(jù)高濃度葡萄糖（200 mmol/L）對腎小球系膜HBZY-1細(xì)胞氧化應(yīng)激的嚴(yán)

2、重程度進(jìn)行分組（1組（200 mmol/L高糖組）、2組（200 mmol/L高糖組+FK866組）、3組（200 mmol/L高糖組+NMN組）、4組（200 mmol/L高糖組+FK866+NMN組）；對照組分別為：5組(0.56 mmol/L葡萄糖)及6組（0.56 mmol/L葡萄糖+FK866）和7組（0.56 mmol/L葡萄糖+NMN）），通過免疫熒光方法檢測腎小球系膜細(xì)胞中Nampt和NF-κB、Sirt1表達(dá),分析它們

3、的相互關(guān)系，并通過免疫印跡方法對各相關(guān)蛋白的表達(dá)進(jìn)一步再確認(rèn)，研究內(nèi)源性Nampt與腎小球前纖維化因子VIM表達(dá)的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：糖尿病組腎小球呈明顯萎縮，嚴(yán)重糖尿病組小鼠的腎小球細(xì)胞內(nèi)隨著 Nampt表達(dá)的增加，VIM表達(dá)也明顯增加；隨著時間的延長（0-5d）細(xì)胞內(nèi) Nampt表達(dá)增加，同時NF-κB的表達(dá)也隨之升高，而細(xì)胞內(nèi)的 Sirt1表達(dá)卻明顯減少（p﹤0.01）。隨著 Nampt表達(dá)的減少， VIM呈現(xiàn)表達(dá)明顯減少