青蒿素增強三氧化二砷的抗腫瘤作用并降低其心臟毒性的研究.pdf

1、三氧化二砷(As2O3)是一種在臨床上被廣泛應(yīng)用于治療復(fù)發(fā)或難治性急性早幼粒細胞白血病(APL)的有效藥物，研究發(fā)現(xiàn)，砷劑治療復(fù)發(fā)性急性早幼粒細胞白血病的完全緩解率高達80-90％。隨著對As2O3在藥理學(xué)方面的研究的不斷深入，它在實體瘤化療方面的應(yīng)用也取得了巨大的進步。不幸的是，其嚴(yán)重的心臟毒副作用限制了它的廣泛應(yīng)用，心臟毒副作用主要表現(xiàn)有:QT間期延長，從而導(dǎo)致尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速及心臟驟停。其心臟毒性的機制可能與DNA修復(fù)和甲基

2、化、活性氧的產(chǎn)生、心肌離子通道的改變和凋亡有關(guān)。因此，讓As2O3與心臟保護因子聯(lián)用可能是一種有效的手段。青蒿素，一種從菊科植物黃花篙（通常稱為青蒿）中提取出的倍半萜內(nèi)酯化合物，通常作為抗瘧疾藥物使用。有研究發(fā)現(xiàn)，青蒿素還具有多種生物活性和藥理作用，如抗炎作用，抗氧化作用等等。同時也發(fā)現(xiàn)青蒿素還能有效的預(yù)防和治療心臟肥大，心臟衰竭。此外，有研究表明青蒿素還可以作為抗癌劑使用，而且相比于正常細胞，對腫瘤細胞表現(xiàn)出更多的細胞毒性。本研究的目

3、的是調(diào)查As2O3與青蒿素合用的交互效應(yīng)以及青蒿素對As2O3引起的小鼠心臟毒性可能的保護作用。
　　使用A549，Hela以及HepG2細胞的體外模型來調(diào)查兩藥合用的交互效應(yīng)。四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)測定As2O3與青蒿素的抗腫瘤效應(yīng)。用等效線圖解法和合用指數(shù)分析評估兩種藥物是否產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。劃痕實驗被用來調(diào)查細胞遷移率。進一步在熒光顯微鏡下分析細胞形態(tài)變化，以及采用流式細胞儀分析測量細胞凋亡情況。最后檢測分析細胞內(nèi)的活性

4、氧(ROS)的生成。
　　MTT實驗證明青蒿素能夠明顯增強As2O3的抗癌細胞增殖作用。進一步采用等效線法發(fā)現(xiàn)，As2O3與青蒿素對A549，Hela和HepG2細胞產(chǎn)生協(xié)同抗腫癌作用。對A549細胞進行AO染色后觀察和用流式細胞儀檢測Hela細胞后發(fā)現(xiàn)，青蒿素夠顯著增強As2O3誘導(dǎo)的腫瘤細胞凋亡與壞死。此外，青蒿素與As2O3合用后，Hela細胞內(nèi)的活性氧水平明顯增加。
　　在以小鼠為模型的體內(nèi)實驗中，小鼠隨機分為4組:

5、對照組，As2O3組，青蒿素組與合用組。觀察小鼠的體重，一般狀況和死亡率。心電描記法實驗之前和之后的心電圖變化，測定血清乳酸脫氫酶(LDH)水平來評估心臟功能。實驗結(jié)束后取小鼠心臟組織觀察形態(tài)學(xué)的變化和細胞凋亡情況。與正常對照組相比，As2O3組小鼠體重明顯減少，血清LDH活力顯著升高，QT間期延長，心肌組織結(jié)構(gòu)損傷顯著。經(jīng)過青蒿素的預(yù)處理后，As2O3引起的上述改變明顯減輕。與As2O3組相比，合用組的QT間期明顯變短，用DNA斷裂的