β-谷甾醇對人肺癌細胞增殖、凋亡影響的初步研究.pdf

1、目的：肺癌是世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。其中非小細胞型肺癌占肺癌總數(shù)的75％-80%，絕大部分患者確診時已為中晚期。國內(nèi)外多項研究發(fā)現(xiàn)，植物化學物對多種腫瘤具有化學預防作用，本研究以β-谷甾醇為實驗對象，研究它在體外條件下對肺癌細胞增殖和凋亡的影響。
　　方法：不同濃度β-谷甾醇（0、5、10、20、40μM）處理人肺癌A549、NCI-H460細胞24h后，采用細胞活性檢測試劑盒（Cell Counting Kit-

2、8， CCK-8）檢測β-谷甾醇對細胞活性的影響；Annexin V-FITC/PI雙染結合流式細胞術（Flow cytometer，F(xiàn)CM）檢測不同濃度β-谷甾醇（0、2.5、10、40μM）作用下A549細胞周期分布的影響，Real-Time PCR檢測周期相關基因Cyclin B1、Cdk1、Cdc25C的變化；以上同樣實驗條件下，F(xiàn)CM分析β-谷甾醇對A549細胞凋亡率的變化，Western Blotting檢測凋亡相關蛋白p5

3、3、Bax和Bcl-2的變化。
　　結果：β-谷甾醇以劑量依賴性方式明顯抑制A549細胞的生長，與對照組相比存在顯著統(tǒng)計學差異（P＜0.01），對NCI-H460亦有細胞活性抑制作用（P＜0.05）；流式結果分析表明β-谷甾醇作用A549細胞24h后，細胞周期各期均出現(xiàn)不同程度的變化，但與對照組相比G2/M期的差異有統(tǒng)計學意義( P＜0.05)，而G0/G1和S期未見明顯變化，同時Cdc25C、Cyclin B1、CDK1 mRN