綿馬貫眾間苯三酚類成分提取分離及抑菌活性研究.pdf

1、綿馬貫眾為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨（DryopteriscrassirhizomaNakai）的干燥根莖及葉柄殘基，秋季采挖，削去葉柄，須根，除去泥沙，曬干所得。綿馬貫眾始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味起初淡而微澀，后漸苦、辛，性微寒，有小毒，具有清熱解毒、殺菌驅(qū)蟲、止血等功效。綿馬貫眾收錄于2015年版《中華人民共和國藥典》，主產(chǎn)于河北、內(nèi)蒙古、東北三省等中國北方地區(qū)。綿馬貫眾為臨床常用中藥材，具有多種藥理活性，主要有抗病毒、抗瘧、抗腫瘤、抗癌

2、、驅(qū)蟲、止血、抗細(xì)菌等臨床應(yīng)用。
　　目前對綿馬貫眾的研究主要集中在抗細(xì)菌感染、抗瘧、抗腫瘤等方向，而對其抑制真菌，尤其是對臨床常見皮膚癬菌的抑制作用研究較少。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)，間苯三酚類化合物對淺部真菌具有明顯的抑制作用，而且鱗毛蕨屬植物富含間苯三酚類化合物，因此本文擬對綿馬貫眾的間苯三酚類化合物進(jìn)行提取分離，并對間苯三酚類化合物對淺部真菌抑制活性進(jìn)行研究。
　　主要研究內(nèi)容：
　　1、采用硅膠柱色譜法、凝膠柱色

3、譜法、重結(jié)晶法、ODS柱色譜法和制備液相色譜法對綿馬貫眾進(jìn)行分離純化，得到單體化合物。根據(jù)所得單體化合物的理化性質(zhì)、顯色反應(yīng)、1H-NMR數(shù)據(jù)和13C-NMR數(shù)據(jù)等，解析出單體化合物結(jié)構(gòu)式。
　　2、采用M38-A2微量稀釋法，對分離得到的3個(gè)間苯三酚類化合物，篩選其對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌三種真菌的抑菌活性，測定其最小抑菌濃度（MIC）。
　　主要研究結(jié)果：
　　1、從綿馬貫眾中分離得到12個(gè)化合物，通過

4、其理化性質(zhì)、顯色反應(yīng)和波譜數(shù)據(jù)等鑒定了12個(gè)化合物，它們分別為間苯三酚類化合物10個(gè)：Albaspidin AA（白綿馬素AA）（Y2），Trisflavaspidicacid ABB(三環(huán)黃綿馬酸ABB)（Y4），AlbaspidinAP（白綿馬素AP）（Y5），F(xiàn)lavaspidic acid PB（黃綿馬酸 PB）（Y6），Aspidin AB（綿馬素AB）（Y7），AlbaspidinPP（Y8），filixic acid AB

5、P(綿馬酸ABP)（Y9），Desapidin AB（Y10），Albaspidin PB（Y11），F(xiàn)lavaspidic acid AB(黃綿馬酸AB)（Y12）；脂肪酸類化合物1個(gè)：(10E,12E)-9-oxooctadeca-10,12-dienoic acid（Y1），飽和脂肪醇類化合物1個(gè)：Pentacosanol（Y3）。
　　2、分離出的3個(gè)單體化合物對須癬毛癬菌（Trichophyton mentagrophy

6、tes）的MIC值>160μg/mL；3個(gè)單體化合物TrisflavaspidicacidABB、AlbaspidinAA和Flavaspidic acid AB，對紅色毛癬菌（Trichophyton rubrum）的MIC分別為：160μg/mL、60μg/mL、70μg/mL；3個(gè)單體化合物TrisflavaspidicacidABB、AlbaspidinAA和Flavaspidic acidAB對犬小孢子菌（Microsporu

7、m canis）的MIC分別為：140μg/mL、90μg/mL、80μg/mL。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)從綿馬貫眾中分離得到12個(gè)化合物，其中包括10個(gè)間苯三酚類化合物，1個(gè)脂肪酸化合物和1個(gè)飽和脂肪醇化合物，其中化合物Y1，Y10，Y11為首次從該植物分離得到；3個(gè)間苯三酚類化合物均具有一定的抑制真菌活性，其對紅色毛癬菌的抑菌活性順序?yàn)椋篈lbaspidinAA＞Flavaspidic acidAB＞Trisflavas