2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過觀察大鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細胞(Enteric gliacells,EGCs)在體外循環(huán)致腸屏障損傷中的變化特點,進而探討α7nAchR激動劑對體外循環(huán)大鼠EGCs的影響與可能機制。
  方法:
  選擇成年清潔SD大鼠96只,400~500g,按隨機數(shù)字表法隨機分為4組,分別為假手術(shù)組(S組)、體外循環(huán)(CPB)組(C組)、PHA568487+體外循環(huán)(CPB)組(P組)、MLA(Methyllycaconi

2、tine)+PHA568487+體外循環(huán)(CPB)組(M組),每組按各采血時相點分為4個亞組,每一亞組6只大鼠。實驗大鼠術(shù)前禁食6h,不禁水,腹腔注射10%水合氯醛麻醉(300mg/kg)。S組麻醉后經(jīng)左股動脈、尾動脈、右股靜脈及右頸內(nèi)靜脈穿刺置管;C組麻醉置管后建立體外循環(huán)(CPB)模型,維持時間為1小時;P組麻醉置管并給予PHA568487(0.8mg/kg)腹腔注射30min后建立體外循環(huán)(CPB)模型;M組麻醉置管并給予PHA5

3、68487(0.8mg/kg)腹腔注射,30min后再給予MLA(6mg/kg)腹腔注射,并建立體外循環(huán)(CPB)模型。隨后各實驗組分別在CPB開始時(T0)、CPB60min(T1)、停CPB后2h(T2)、停CPB后6h(T3)時間點于右頸內(nèi)靜脈采集血液標本,記錄血流動力學變化及血氣分析結(jié)果,ELISA法檢測血清白細胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、D一乳酸、腸脂肪酸結(jié)合蛋白(I-FABP)的變化;分別于各時間點脊

4、椎脫臼法處死實驗大鼠后取空、回腸組織制作病理切片,HE染色觀察各組形態(tài)學變化;Western-blot法檢測腸粘膜緊密連接蛋白ZO-1、Occludin及腸膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)、鈣結(jié)合蛋白(S-100)的表達變化;免疫組化法觀察CPB后EGCs的變化。統(tǒng)計學分析與處理可利用SPSS19.0軟件,結(jié)果用均數(shù)±標準差((-)x±s)表示,單因素方差分析用于組間比較,重復(fù)測量設(shè)計的方差分析用于組內(nèi)比較,當p<0.05時證明差異有統(tǒng)計學

5、意義。
  結(jié)果:
  1.大鼠腸組織形態(tài)學變化結(jié)果
  各組大鼠腸粘膜組織切片均選取T2時間點進行比較。
  光鏡下HE染色顯示,S組腸粘膜未見明顯改變;C組腸粘膜出現(xiàn)不同程度的損傷,絨毛縮短,腸粘膜出血、水腫,炎性細胞浸潤,腸上皮細胞變性、壞死;P組和M組腸粘膜損傷均減輕,P組損傷最輕,僅有輕度腸粘膜腺體擴張,腸上皮細胞輕度變性,少量炎性細胞釋放。
  2.血清IL-6和TNF-α水平的變化
  

6、與S組比較,C組、P組和M組大鼠血清IL-6和TNF-α水平在T1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與C組比較,P組和M組大鼠血清IL-6和TNF-α水平在T1~T3時間點均降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與P組比較,M組大鼠血清IL-6和TNF-α水平在T1—T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  3.血清D一乳酸和I-FABP水平的變化
  與S組比較,C組、P組和M組大鼠血

7、清D-乳酸和I-FABP水平在T1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與C組比較,P組和M組大鼠血清D一乳酸和I-FABP水平在T1~T3時間點均降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與P組比較,M組大鼠血清D一乳酸和I-FABP水平在T1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  4.腸上皮緊密連接蛋白ZO-1和occludin表達的變化
  與S組比較,C組、P組和M組大鼠腸上皮ZO-

8、1和occludin表達在T1~T3時間點均降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與C組比較,P組和M組大鼠腸上皮ZO-1和occludin表達在T1—T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與P組比較,M組大鼠腸上皮ZO-1和occludin表達在T1~T3時間點均降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  5.腸膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP表達的變化
  與S組比較,C組、P組和M組大鼠腸上皮GFAP表達在T

9、1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與C組比較,P組和M組大鼠腸上皮GFAP表達在T1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與P組比較,M組大鼠腸上皮GFAP表達在T1~T3時間點降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  6.鈣結(jié)合蛋白S-100表達的變化
  與S組比較,C組、P組和M組腸組織S-100蛋白表達在T1~T3時間點均升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);與C組比較,P

10、組和M組腸組織S-100蛋白表達在T1~T3時間點均降低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);一與P組比較,M組腸組織S-100表達在T1~T3時間點升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
  7.免疫組化法檢測腸膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP表達的變化
  各組大鼠GFAP陽性表達結(jié)果均選取T2時間點進行比較。
  免疫組化結(jié)果顯示,GFAP存在于大鼠回腸組織的腸神經(jīng)膠質(zhì)細胞中,被染成棕褐色的顆粒為GFAP陽性表達的細胞。

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