可口可樂(lè)對(duì)C57BL-6小鼠肥胖的影響.pdf

1、背景：自進(jìn)入二十一世紀(jì)以來(lái)，由于我國(guó)居民飲食結(jié)構(gòu)的多樣化，我國(guó)的高血壓、糖尿病、高脂血癥等慢性代謝性疾病顯著增加。而且這幾種疾病常先后或同時(shí)出現(xiàn)。它們的發(fā)病機(jī)制可能與胰島素抵抗有關(guān),在臨床工作中常被稱之為代謝綜合征(MS)。目前MS受到國(guó)內(nèi)外大多數(shù)人們的普遍關(guān)注，它已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。肥胖不僅是形成代謝綜合征的中心環(huán)節(jié)，它也屬于代謝綜合征。研究肥胖形成的因素十分重要，這關(guān)乎著全民身體健康的大事情。從上世紀(jì)70年代開(kāi)始，飲用含糖飲

2、料的人數(shù)逐漸增多，與之相對(duì)應(yīng)的的是超重、肥胖和2型糖尿病發(fā)病率的不斷上升?？煽诳蓸?lè)不僅是含有高糖成分的碳酸飲料，而且還是含有咖啡因成分的飲料，可口可樂(lè)以其獨(dú)特的口味深受大多數(shù)人的喜愛(ài)，它的銷售量在飲料行業(yè)中居于首位。目前研究可口可樂(lè)對(duì)人們肥胖的影響十分重要。為了研究可口可樂(lè)對(duì)人們肥胖的影響，我們運(yùn)用C57BL/6小鼠，讓這些小鼠長(zhǎng)期自由飲用可口可樂(lè)?？煽诳蓸?lè)對(duì)小鼠肥胖的影響如何?可口可樂(lè)能使小鼠的身體狀態(tài)發(fā)生什么樣的變化？本文就這些問(wèn)題

3、進(jìn)行研究。
　　目的：探討可口可樂(lè)對(duì)C57BL/6小鼠肥胖的影響。
　　方法：⑴8周齡C57BL/6雄性小鼠購(gòu)買于南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所。在河南大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)中心，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，然后按照隨機(jī)原則分為4組：普通飼料飲水組(NFD+W組），普通飼料飲用可口可樂(lè)組（NFD+CC組），高脂飼料飲水組（HFD+W組），高脂飼料飲用可口可樂(lè)組（HFD+CC組)進(jìn)行造模。⑵每隔2日檢查一次小鼠的狀況，如覓食、運(yùn)動(dòng)程

4、度、精神狀態(tài)、皮毛光澤度等情況，并每周監(jiān)測(cè)小鼠體重和進(jìn)食的變化，血糖的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)進(jìn)行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(Oral glucose tolerance test，OGTT)及胰島素耐量實(shí)驗(yàn)(Insulin tolerance test，ITT)，然后處死小鼠，測(cè)量小鼠的體長(zhǎng)，收集血液和組織材料，分別冷凍或固定保存。⑶小鼠血漿用Cobas8000羅氏全自動(dòng)生化免疫血清工作站檢測(cè)分析，主要檢測(cè)血漿中的甘油三酯（Triglyceride，

5、TG），總膽固醇（Total cholesterol，TC），高密度脂蛋白（High density lipoprotein，HDL），低密度脂蛋白（Low density lipoprotein，LDL），谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine transaminase，ALT)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate transaminase，AST)。然后利用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-linked immunosorbent a

6、ssay， ELISA）檢測(cè)小鼠的血漿胰島素（Insulin，INS)、兒茶酚胺(Catecholamine，CA)、游離脂肪酸（Free fatty acide，F(xiàn)FA)的吸光度。⑷小鼠用1-3％戊巴比妥鈉鹽針劑進(jìn)行麻醉，先進(jìn)行心臟取血，收集血液，然后取出小鼠的附睪旁脂肪組織，肝臟組織，并分別進(jìn)行稱重。附睪旁脂肪組織進(jìn)行石蠟切片。切片經(jīng)蘇木精—伊紅( Hematoxylin-eosin，HE)染色法，染色觀察組織的病理變化情況。

7、>　　結(jié)果：①?gòu)牡?周開(kāi)始，HFD+CC組小鼠的體重增長(zhǎng)比HFD+W組的低；NFD+CC組小鼠的體重增長(zhǎng)與NFD+W組相比，無(wú)明顯差異。②與NFD+W組小鼠相比，NFD+CC組小鼠的Lee’s指數(shù)較低，沒(méi)有明顯差異；與HFD+W組小鼠相比，HFD+CC組小鼠的Lee’s指數(shù)較低，有明顯差異；與NFD+W組小鼠相比，HFD+W組小鼠的Lee’s指數(shù)較高，有明顯差異。③NFD+CC組和NFD+W組相比較，NFD+CC組小鼠平均每天的攝食量較

8、少，有明顯的差異；HFD+CC組小鼠平均每天的攝食量比HFD+W組小鼠的少，有明顯的差異。④與NFD+W組相比，NFD+CC組小鼠的附睪旁脂肪組織重量及附睪旁脂肪指數(shù)較少，但是無(wú)明顯差異；HFD+CC組的附睪旁脂肪組織重量及附睪旁脂肪指數(shù)比HFD+W組的少，但是無(wú)明顯的差異；NFD+CC組小鼠的附睪旁脂肪組織重量及附睪旁脂肪指數(shù)比HFD+CC組的少，有明顯的差異。NFD+CC組小鼠的肝臟重量及肝臟指數(shù)比NFD+W組小鼠的少，但是沒(méi)有明顯

9、的差異；與HFD+W組相比，HFD+CC組的肝臟組織的重量及肝指數(shù)較少，但是沒(méi)有明顯的差異。⑤附睪旁脂肪組織通過(guò)制作切片,在光學(xué)顯微鏡下拍照，截取500x500像素的圖像進(jìn)行觀察分析：NFD+CC組小鼠的附睪旁脂肪細(xì)胞數(shù)量比NFD+W組的多；與HFD+W組小鼠相比，HFD+CC組的小鼠的附睪旁脂肪細(xì)胞數(shù)量較多。NFD+CC組小鼠比NFD+W組小鼠的脂肪細(xì)胞體積??；HFD+CC組小鼠比HFD+W組小鼠的附睪旁脂肪細(xì)胞面積小。⑥與NFD+W

10、組小鼠和NFD+CC組小鼠相比，HFD+W組小鼠血漿中的ALT、AST、TC、TG及LDL-C含量明顯升高，它的HDL-C含量降低；HFD+CC組小鼠的AST、ALT、TG、TC及LDL-C含量比HFD+W組的低，它的HDL-C含量升高；NFD+CC組小鼠的ALT、AST、TC、TG、LDL-C和HDL-C含量與NFD+W組相比無(wú)明顯差異：HFD+W組小鼠分別和NFD+W組小鼠和NFD+CC組小鼠相比，其AUC值（OGTT、ITT)明顯

11、升高,有明顯差異；HFD+CC組小鼠的AUC值（OGTT、ITT)比HFD+W組小鼠的低，但是無(wú)明顯差異；NFD+CC組小鼠的AUC值（OGTT、ITT)比NFD+W組小鼠的低，但是無(wú)明顯差異。⑦與NFD+W組小鼠相比，HFD+W組小鼠和HFD+CC組小鼠的游離脂肪酸吸光度和胰島素吸光度表達(dá)水平均升高；HFD+CC組小鼠的游離脂肪酸吸光度和胰島素吸光度表達(dá)水平比HFD+W組小鼠的高，但無(wú)明顯差異；NFD+CC組小鼠的游離脂肪酸吸光度和胰