內(nèi)皮素受體拮抗劑改善小鼠糖尿病心肌纖維化的分子機(jī)制研究.pdf

1、糖尿病患者即使在血糖控制較好的情況下，糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥仍然有很高的發(fā)病率。在糖尿病患者中，持續(xù)血漿中的高內(nèi)皮素-1，已經(jīng)被證實(shí)與心肌纖維化的進(jìn)展是密切相關(guān)的，這可能主要由細(xì)胞外基質(zhì)聚集與纖維母細(xì)胞增殖引起。由于內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，主要是起源于內(nèi)皮素-1，內(nèi)皮素-1被人們認(rèn)為在糖尿病的并發(fā)癥的病理生理學(xué)中起著重要的作用。然而，潛在的機(jī)制仍然不是很清楚。這里我們假設(shè)內(nèi)皮素-1可能促進(jìn)心肌纖維化與心功能不全的進(jìn)展。
　　目的:探討內(nèi)皮素

2、受體拮抗劑對糖尿病心肌纖維化的潛在保護(hù)效應(yīng)。
　　方法:將6周齡雄性C57BL/6小鼠分為3組:對照組、糖尿病組、糖尿病+波生坦組，每組15只。鏈脲佐菌素(STZ)按70mg/kg單次劑量腹腔注射。在STZ注射后即刻、1周、2周測定小鼠的空腹血糖，以確定糖尿病模型是否建立。在STZ注射后第2天糖尿病+波生坦組小鼠灌胃內(nèi)皮素受體拮抗劑波生坦(100mg/kg)，其余兩組灌胃等量的0.9％氯化鈉溶液，每天1次直到24周。通過形態(tài)學(xué)分析

3、與電子顯微鏡評估心肌纖維化程度，應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶連鎖反應(yīng)去檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)、及膠原蛋白1(collagen-1)的信使核糖核酸(mRNA)的表達(dá)，通過超聲心動圖去評估心臟的收縮功能。
　　結(jié)果:24周后，測量小鼠的空腹血糖，糖尿病組與糖尿病+波生坦組接近(P＞0.05)，兩組血糖與對照組相比顯著增高(P＜0.01)。HE染色表明，在糖尿病組心肌間質(zhì)有大量

4、炎性細(xì)胞浸潤、心肌間質(zhì)纖維化及心肌細(xì)胞肥大，與糖尿病組相比，糖尿病+波生坦組心肌纖維化明顯減輕。通過Masson染色病理分析表明，在糖尿病組心肌組織中纖維化改變十分明顯，與糖尿病組相比，糖尿病+波生坦組心肌纖維化明顯減輕。電鏡觀察看到，在糖尿病組心肌組織中肌小節(jié)、肌原纖維層及線粒體破裂，糖尿病+波生坦組肌小節(jié)、肌原纖維層及線粒體破裂較糖尿病組明顯減輕。VEGF及纖維化基因(TGF-β，CTGF and Collagen-1)與心肌纖維化

5、密切相關(guān)。與糖尿病組相比，糖尿病+波生坦組血管內(nèi)皮生長因子的mRNA的表達(dá)增高，纖維化基因(TGF-β，CTGF and Collagen-1)的mRNA表達(dá)降低(P＜0.01)。另外，在糖尿病的狀態(tài)24周后，與對照組相比，糖尿病組小鼠的心臟收縮功能明顯降低(P＜0.001)，然而，與糖尿病組小鼠相比，糖尿病+波生坦組小鼠的心臟收縮功能明顯升高(P＜0.001)，甚至與對照組小鼠心臟收縮功能無差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:在不