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1、目的:滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞與其他組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞相比成軟骨細(xì)胞的能力更強。通過共培養(yǎng),利用細(xì)胞間的相互作用促進干細(xì)胞的分化,結(jié)合復(fù)合支架材料提供三維空間更利于細(xì)胞的分化。本研究的目的是將滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞混合培養(yǎng)于天然及人工支架材料上,觀察三維環(huán)境下滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞混合培養(yǎng)后的修復(fù)破損關(guān)節(jié)盤的能力。
方法:取 SD大鼠滑膜組織及軟骨組織,酶消化法獲得滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞及軟骨細(xì)胞分別進行培養(yǎng)。取第3代滑膜間充質(zhì)
2、干細(xì)胞和第2代軟骨細(xì)胞,二者以1∶2的比例混合培養(yǎng)負(fù)載于殼聚糖/I型膠原天然支架材料上,回植入裸鼠皮下培養(yǎng)4周、8周,進行免疫組織化學(xué)檢測。
結(jié)果:回植4周,8周后,支架材料保持圓盤狀,破損關(guān)節(jié)盤同殼聚糖支架緊密粘連,表面附有一層筋膜,HE染色顯示8周時細(xì)胞進入材料內(nèi)部較4周時明顯增多,破損關(guān)節(jié)盤與支架材料接觸部位被細(xì)胞基質(zhì)相連,經(jīng)免疫組織化學(xué)檢測,可見細(xì)胞及細(xì)胞基質(zhì)II型膠原陽性表達,甲苯胺藍染色,蛋白聚糖陽性表達。免疫組化
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