人臍帶間充質(zhì)干細胞對類噬血細胞綜合征小鼠模型肝臟損傷治療作用及機制的研究.pdf

1、第一部分改良建立類噬血細胞綜合征小鼠模型
　　目的：改良建立類噬血細胞綜合征（hemophagocytic syndrome,HPS）小鼠模型，為其后續(xù)治療研究提供良好的載體。
　　方法：成年野生型 C57BL/6雄性小鼠按完全隨機方法分為實驗組（CPG組）及對照組（PBS組），CPG組以隔日腹腔注射CPG-ODN1826一次及每日皮下注射IFN-?兩次的方法建立，PBS組則給予對應量PBS緩沖液，干預周期為10天，干預期間

2、觀察小鼠一般活動，干預結(jié)束后收集血液標本及組織標本進行HPS相應指標檢測。
　　結(jié)果：與PBS組相比，CPG組小鼠出現(xiàn)精神萎靡、活動減少、體重減少等；肝重體重比、脾重體重比顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；外周血三系下降，其中WBC的降低主要是有淋巴細胞的降低引起，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；血生化：ALT、AST、TG、LDH均顯著升高，ALB、FbG顯著下降,差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；血清鐵蛋

3、白顯著升高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；血清中IL-6、IL-10、IFN-γ水平顯著升高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；肝臟、脾臟、股骨病理變化：肝細胞胞漿疏松，肝竇擴張充血，可見血管及肝竇周圍炎癥細胞聚集灶，偶見血管內(nèi)血栓形成；脾臟結(jié)構(gòu)混亂，紅髓、白髓分界不清，可見大量有核細胞浸潤；股骨切片見骨髓嚴重發(fā)育不良，造血面積減少；同時在肝臟、脾臟及骨髓中均可見吞噬血細胞現(xiàn)象。
　　結(jié)論：CPG-ODN1826聯(lián)合I

4、FN-γ可使C57BL/6小鼠出現(xiàn)類HPS癥狀，且增加IFN-γ可增加模型穩(wěn)定性，為后續(xù)治療研究提供良好載體。
　　第二部分人臍帶間充質(zhì)干細胞對類噬血細胞綜合征小鼠模型肝臟損傷修復作用及機制初探
　　目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）對類噬血細胞綜合征（hemophagocytic lymphohistocytosis，HL

5、H）小鼠模型肝臟損傷的修復作用及相關機制。
　　方法：hUC-MSCs的體外標記；將成年野生型C57BL/6小鼠54只按完全隨機方法分為模型損傷組（PBS組）、干細胞治療組（MSC組）、正常對照組（CON組），模型采用CPG-ODN1826聯(lián)合IFN-γ誘導產(chǎn)生，MSC組治療采用hUC-MSCs經(jīng)尾靜脈移植。觀察移植后第1、3、7天小鼠一般情況、血生化(ALT、AST、TG)，外周血（WBC、PLT、RBC、HGB）,第7天肝質(zhì)量

6、體質(zhì)量比，HE染色觀察肝臟組織病理改變，免疫組化法觀察第7天肝臟中活化巨噬細胞的數(shù)量,熒光顯微鏡下觀察MSC組CM-Dil標記的hUC-MSCs的肝內(nèi)定植，免疫熒光法觀察第7天MSC組肝臟中抗人白蛋白抗體陽性細胞的數(shù)量。
　　結(jié)果：與PBS組相比，MSC組小鼠的狀態(tài)好轉(zhuǎn)，肝質(zhì)量體質(zhì)量比顯著下降（P<0.05）；ALT、AST、LDH、ALB、TG顯著降低（P<0.05），ALB無顯著升高（P>0.05），肝臟炎癥浸潤減少、肝組織損