延胡索中生物堿類化合物的分離純化及指紋圖譜研究.pdf

1、本文以延胡索中生物堿類化合物為模式物，針對延胡索有效成分延胡索乙素傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝存在收率低、能耗高、耗時長、質(zhì)量控制不穩(wěn)定等問題，提出了提取一層析分離-高速逆流色譜快速純化的延胡索乙素生產(chǎn)新工藝，并建立了基于數(shù)字化指紋圖譜技術(shù)評價元胡止痛片的質(zhì)量控制標準，要點如下： 在提取過程中，考察了提取工藝的主要參數(shù)，建立了適合不同分離純化要求的延胡索提取工藝：在層析分離過程中，通過靜態(tài)吸附和動態(tài)吸附相關(guān)參數(shù)對離子交換樹脂進行優(yōu)化，篩選出適合

2、于延胡索分離的D152樹脂。在優(yōu)化的條件下，延胡索乙素的純度從原料中峰面積百分比的4.11％提高到21.13％，收率為65.50％，相比于液液萃取及沉淀法分離延胡索乙素，離子交換樹脂分離法具有收率高、處理能力大、操作簡便和再生利用容易等優(yōu)點；粗制樣品通過高速逆流色譜一步分離獲得高純度延胡索乙素。由于在高速逆流色譜中溶劑體系的篩選占了90％以上的工作量，本文提出了一種新概念，建立了新方法(平均極性P')，這種新的溶劑體系篩選方法，可以一步

3、從上百種溶劑體系中中篩選到幾種合適的溶劑體系，極大地縮短了工作量，提高了工作效率，有利于高速逆流技術(shù)的推廣。上機實驗對新方法進行了驗證，采用正已烷：乙酸乙酯：甲醇：水(4-6-5-5)一步分離成功延胡索乙素，純度為92.7％，回收率達到95.1％。 根據(jù)美國FDA、WHO、歐洲藥典以及國家藥品監(jiān)督管理局的要求，草藥制劑生產(chǎn)商提供原料、半成品及成品的指紋圖譜以保證其品種的真實性和批次間質(zhì)量的穩(wěn)定性。本文建立了一種適合于含生物堿化合

4、物指紋圖譜分析的流動相，并對原理進行了討論。通過改變流動相的梯度建立了兩種以生物堿類化合物為指標物的中成藥高效液相指紋圖譜，進一步以相對保留時間作為定性依據(jù)，相對峰面積作為定量依據(jù)，以及特征指紋總差異率和重疊率等構(gòu)建了高效液相色譜數(shù)字化指紋譜，消除了操作過程中各種操作因素的影響，有效地降低了色譜保留值的波動性，使不同樣品之間可以進行量化比較；繪制了特征指紋曲線，直觀表現(xiàn)了不同樣品之間的近似程度；以圖像式指紋圖譜和數(shù)字化指紋譜評價了不同廠