稀有鮈鯽受精生物學(xué)研究.pdf

1、稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)隸屬鯉形目(Cypriniformcs)，鯉科(Cyprinidae)，鮈鯽屬，為我國特有的一種小型淡水魚類，因其生物學(xué)特性與斑馬魚相似，也是十分重要的實驗動物。
　　 實驗所用親魚為淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點實驗室所培育的一齡性成熟稀有鮈鯽。選取健康的成熟親魚22對分別飼養(yǎng)于同一水族箱中，選擇性狀良好的親魚進(jìn)行人工干法受精，按一定的時間段對激活的卵子進(jìn)行取材，采用細(xì)胞學(xué)、組織

2、學(xué)、受精生物學(xué)、掃描電鏡和透射電鏡等技術(shù)對稀有鮈句鯽精巢和受精卵的結(jié)構(gòu)、精子入卵過程、皮層反應(yīng)和雌雄原核遷移與結(jié)合等進(jìn)行了詳細(xì)的研究。結(jié)果表明：
　　 稀有鮈鯽精巢為小葉型。精子由頭部、中片和尾部3部分組成。頭部圓球形，前端無頂體，寬(1.427±0.03)μm；中片較短，由中心粒和袖套組成，中心粒復(fù)合體包括近端中心粒和基體，兩者呈“L”型排列；精子尾部的主要結(jié)構(gòu)為軸絲，屬典型的“9+2”型雙聯(lián)微管結(jié)構(gòu)，無側(cè)鰭。
　　

3、成熟卵圓球形，沉性，卵徑(1.024±0.03)mm，卵膜在動物極頂端中央凹陷形成精孔器，精孔器周圍直徑(0.247±0.01)mm范圍以外的卵子表面密布絨毛。精孔器為深凹陷、短孔道型，由前庭和精孔管組成，前庭漏斗狀，表面光滑，最大直徑(159.178±0.608)μm，深(39.299±0.607)μm，精孔器區(qū)域具有“精子捕捉”功能，一旦精子進(jìn)入其中，受精率將提高到99.996。精孔管呈上粗下細(xì)的管狀，長(8.318±0.055)μ

4、m，內(nèi)口徑(3.651±0.055)μm，為精子頭寬的兩倍。據(jù)內(nèi)含物的形態(tài)及性質(zhì)可將皮層小泡分為三種類型。據(jù)皮層小泡的釋放程度可將皮層反應(yīng)分為潛伏期、發(fā)展期、高潮期和衰退期四個時期。
　　 對去卵膜卵子的掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，在質(zhì)膜精孔器凹陷中央有一短的胞質(zhì)突起，為精子入卵位點。受精0s，精孔管被精孔細(xì)胞堵塞，精子向精孔器定向游動，推測精孔細(xì)胞具有吸引精子入卵的功能。受精3s，精子開始穿過精孔管，受精10s，精孔管堵塞，精子進(jìn)入皮層

5、區(qū)。受精25s，精子星光形成。受精30s，受精錐形成。受精50s，皮層反應(yīng)進(jìn)入高潮期，皮層小泡大量釋放，卵表面粘附大量精子。受精120s，前庭內(nèi)精子形態(tài)完全模糊。受精150s，受精錐解體。受精270s，質(zhì)膜修復(fù)。受精5min，卵子進(jìn)入第二次減數(shù)分裂末期，第二極體形成。受精20min，雄性原核形成。受精30min，雌雄原核結(jié)合。受精45min，卵子處于第一次有絲分裂中期。受精80min，卵子處于第一次減數(shù)分裂末期。
　　 透射電鏡

6、觀察，稀有鮈鯽的卵膜分為初級卵膜和次級卵膜。初級卵膜厚(7.167±0.281)μm，由附屬膜和輻射膜組成。附屬膜厚(0.414±0.015)μm，分為兩層，受精后變化不明顯；輻射膜厚(6.855μ0.047)μm，主要由彈性纖維組成，分為7層，受精后變化明顯。在受精后40-70s，大量皮層小泡釋放，卵膜膨脹，卵膜厚度達(dá)最大，之后隨著皮層反應(yīng)的繼續(xù)進(jìn)行，卵膜逐漸外舉硬化形成受精膜。稀有鮈鯽卵膜外舉分為四個時期：準(zhǔn)備期、始發(fā)期、發(fā)展期和形