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文檔簡介
1、目的:探討同種異體骨髓單個核細(xì)胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNCs)移植入脊髓全橫斷損傷大鼠對損傷脊髓組織局部微環(huán)境中巢蛋白(nestin)和突觸素Ⅰ(Synapsin I)表達(dá)的影響及意義。
方法:100只清潔級Wistar大鼠(雌雄不限)隨機(jī)取96只分為三組:正常對照組32只:切除相應(yīng)的椎板不損傷脊髓;模型組32只:建立脊髓全橫斷模型;細(xì)胞移植組32只:建立脊髓全橫斷模型后,給予骨髓
2、單個核細(xì)胞(BMMNCs)移植治療。各組大鼠分別于不同時間段(3d、1w、2w、4 w)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)和RT-PCR檢測脊髓組織中nestin與Synapsin I的表達(dá)變化,利用MIAS-2000圖像處理系統(tǒng)分析觀察nestin和Synapsin I的陽性產(chǎn)物在脊髓的分布,并測量陽性產(chǎn)物的光密度值。采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù),組間比較,方差齊者采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的方差分析,樣本間的兩兩比較用q檢驗(yàn);方差不齊者用成組設(shè)計(jì)多
3、個樣本比較的秩和檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis法),樣本間兩兩比較的秩和檢驗(yàn)(Nemenyi法);P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01為有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:⑴BBB評分顯示術(shù)后正常對照組在各時間點(diǎn)的BBB脊髓功能評分未見明顯變化,屬評分正常;細(xì)胞移植組和模型對照組都有恢復(fù)過程,其中細(xì)胞移植組較模型對照組的大鼠恢復(fù)較好,但均未達(dá)到正常組水平;術(shù)后4周時細(xì)胞移植組BBB評分較模型對照組增加顯著,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
4、義(P﹤0.05)。⑵免疫組織化學(xué)染色、RT-PCR及圖像處理系統(tǒng)分析顯示模型對照組在傷后約3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達(dá)升高,2w達(dá)高峰,4w后nestin表達(dá)明顯下調(diào);細(xì)胞移植組在脊髓傷3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達(dá)升高,1w達(dá)高峰,4w后nestin表達(dá)明顯下調(diào),且各時期與正常對照組、模型對照組相比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。細(xì)胞移植組與模型對照組Synapsin I在損傷3d后可見表達(dá),1w、2w和4w的表達(dá)量
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