青杄中兩個(gè)與花粉萌發(fā)和花粉管生長相關(guān)基因的分離和功能的研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文青杄中兩個(gè)與花粉萌發(fā)和花粉管生長相關(guān)基因的分離和功能的研究姓名：于彥麗申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：鄭成超張凌云20090605青桿中兩個(gè)與花粉萌發(fā)和花粉管生長相關(guān)基因的分離和功能的鑒定4在青桿花粉中超表達(dá)PwTUAl可以提高花粉的萌發(fā)率和花粉管的生長速度，而超表達(dá)尸w刪尸5可以改變花粉管生長方向。5在擬南芥中組成型超表達(dá)PwTUAl使得轉(zhuǎn)基因植株生長遲緩，出現(xiàn)螺旋生長，甚至由于不能夠完成

2、形態(tài)建成而死亡。在擬南芥花粉中專一表黼死歷J可以促進(jìn)花粉的萌發(fā)和花粉管生長，即使是在Ca2和硼濃度非最適培養(yǎng)基中同樣可以起到促進(jìn)作用，并且PwTUAl在擬南芥花粉中的表達(dá)改變了TUA蛋白(微管蛋白Q亞基)在花粉管中的分布模式以及花粉管的超微結(jié)構(gòu)。野生型擬南芥中TUA蛋白主要定位于除花粉管尖端區(qū)域以外的整個(gè)花粉管中，而在轉(zhuǎn)基因擬南芥花粉管的頂端區(qū)域有大量的TUA蛋白存在。野生型擬南芥花粉管壁遠(yuǎn)遠(yuǎn)厚于轉(zhuǎn)基因擬南芥，在轉(zhuǎn)基因擬南芥花粉管頂端存

3、在許多短的游離的胞質(zhì)微管，并且富集小泡，而在野生型擬南芥花粉管的相應(yīng)位置中沒有發(fā)現(xiàn)這些結(jié)構(gòu)。6在擬南芥中超表J盤PwHAP5后，會(huì)影響果莢的排列，但不影響花粉管的生長方向。用青桿轉(zhuǎn)錄因子PwHAP5的N末端77個(gè)氨基酸、C末端130個(gè)氨基酸及全長分別做誘餌篩選青桿花粉和花粉管eDNA文庫，共得到約80個(gè)克隆，經(jīng)重新驗(yàn)證活性后，選擇結(jié)合活性較強(qiáng)的克隆測序。在測序結(jié)果中篩選N7個(gè)與PwHAP5全長、N端和C端均相互作用的克隆。Genl3an