中國北方漢族結(jié)核性腦膜炎患者SLC11A1基因多態(tài)性研究.pdf

1、目的:結(jié)核性腦膜炎(tuberculous meningitis，TBM)簡稱結(jié)腦，是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，主要累及腦膜和腦實(shí)質(zhì)，脊髓和脊膜可同時(shí)受累。據(jù)估計(jì)，全球1/3的人口感染結(jié)核分枝桿菌，10％的感染者發(fā)展成臨床結(jié)核病。2014年WHO報(bào)告指出，2013年全球結(jié)核病新發(fā)患病人數(shù)為900萬，死亡人數(shù)150萬，中國結(jié)核發(fā)病率為70/100000。結(jié)腦僅占結(jié)

2、核病的1％，傳統(tǒng)認(rèn)為結(jié)腦是由結(jié)核分支桿菌通過血液從肺部傳播到腦膜、腦實(shí)質(zhì)和脊髓，5％到15％的肺結(jié)核患者繼發(fā)結(jié)腦。全球感染Mtb的人口只有十分之一發(fā)病，且大多數(shù)表現(xiàn)為肺結(jié)核(pulmonary tuberculosis，PTB)，結(jié)腦僅占一小部分。以上表明某些個(gè)體對(duì)Mtb有易感性，且提示結(jié)腦和肺結(jié)核的免疫機(jī)制不同。而且，目前沒有治療結(jié)腦的最佳化學(xué)方案，而是借鑒肺結(jié)核的治療方案。許多研究已表明宿主基因影響結(jié)核易感性，且與種族有關(guān)系，而大多

3、數(shù)研究只限于肺結(jié)核。溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)體家族11成員1蛋白（solute carrier family11 Amember1 protein，SLC11A1）第543位密碼子的非保守堿基G/A替換（簡稱為D543N）已被證實(shí)與中國肺結(jié)核患者易感性有關(guān)。本研究第一次探討SLC11A1基因單核苷酸D543N多態(tài)性與確診的中國結(jié)腦患者易感性的關(guān)系。
　　方法:病例組為346例患者，包括113例于2014年1月～2014年9月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神

4、經(jīng)內(nèi)科利用改良抗酸染色及臨床表現(xiàn)確診的結(jié)核性腦膜炎患者和233例同時(shí)期就診于河北省胸科醫(yī)院結(jié)核科及石家莊市第五醫(yī)院結(jié)核科的活動(dòng)性肺結(jié)核患者。對(duì)照組為排除結(jié)核病及結(jié)核病既往史的住院病人395例。對(duì)病例組和對(duì)照組采取靜脈血液并提取DNA。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法對(duì)全部樣本進(jìn)行檢測SLC11A1基因D543N位點(diǎn)的多態(tài)性，隨機(jī)挑取病例組和對(duì)照組10％樣本進(jìn)行基因測序復(fù)檢。采用病例-對(duì)照的關(guān)聯(lián)分析方法比較基

5、因型和等位基因分布頻率。
　　所有結(jié)腦患者均進(jìn)行腰椎穿刺術(shù)，行腦脊液常規(guī)、生化、MGG染色、阿利新蘭染色及改良抗酸染色。所有結(jié)腦患者均有發(fā)熱、頭痛的臨床表現(xiàn)，且腦脊液抗酸染色至少有一次為陽性結(jié)果。肺結(jié)核患者均有咳嗽、低熱的臨床表現(xiàn)，至少有一次痰涂片抗酸桿菌陽性。
　　結(jié)果:
　　1、病例組和對(duì)照組:病例組包括346名患者，其中男性232名(67.1％)，女性114名(32.9％)，平均年齡為36.9±17.4歲。病例組

6、包括結(jié)腦組和肺結(jié)核組兩個(gè)亞組:結(jié)腦組包括113名患者，男性70名(61.9％)，女性43名(38.1％)，肺結(jié)核組包括233名活動(dòng)性肺結(jié)核患者，男性162名(69.5％)，女性71名(30.5％)。病例組和對(duì)照組的性別構(gòu)成比較，無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=3.675，P=0.055)，年齡比較，對(duì)照組年齡顯著大于病例組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=18.898，P＜0.001)。經(jīng)過亞組分析，結(jié)腦組和對(duì)照組的性別構(gòu)成比較，無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義(x2=0.106，P=0.745)，年齡比較，對(duì)照組年齡顯著大于結(jié)腦組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.111，P＜0.001);肺結(jié)核組和對(duì)照組的性別構(gòu)成比較，有差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=5.452，P=0.020），年齡比較，對(duì)照組年齡顯著大于肺結(jié)核組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=18.898，P＜0.001)。
　　2、哈迪-溫伯格平衡定律檢測(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE):對(duì)照組SLC11A1基因D5

8、43N位點(diǎn)基因型頻率經(jīng)檢驗(yàn)，符合哈迪-溫伯格平衡定律(P＞0.05)。
　　3、病例組和對(duì)照組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)等位基因和基因型頻率分布的比較:病例組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)等位基因A頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.453，95％ CI:1.076-1.961，P=0.014)。未考慮性別及年齡，卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示:加性模型，病例組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.571，9

9、5％ CI:1.127-2.190，P=0.007);顯性模型，病例組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.564，95％ CI:1.125-2.175，P=0.008)?？紤]年齡和性別后，用多因素Logistic回歸校正后，結(jié)果顯示:加性模型，病例組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG頻率明顯高于對(duì)照組(OR=2.127，95％ CI:1.403-3.225，P＜0.001);顯性模型，病

10、例組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=2.125，95％CI:1.405-3.212, P＜0.001)。
　　4、按病例組的疾病類型進(jìn)行亞組分型:結(jié)腦組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)等位基因A頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.770，95％ CI:1.181-2.654，P=0.005)。未考慮性別及年齡，卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示:加性模型，結(jié)腦組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG頻率明顯高

11、于對(duì)照組(OR=1.981，95％ CI:1.249-3.141，P=0.003);顯性模型，結(jié)腦組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.985，95％ CI:1.257-3.136，P=0.003)。用多因素Logistic回歸校正年齡和性別后，結(jié)果顯示:加性模型，結(jié)腦組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG頻率明顯高于對(duì)照組(OR=2.706，95％ CI:1.509-4.851，P=0.

12、001);顯性模型，結(jié)腦組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=2.647，95％ CI:1.484-4.720，P=0.001)。肺結(jié)核組D543N位點(diǎn)等位基因A頻率和對(duì)照組相比，無明顯差異(OR=1.313，95％ CI:0.937-1.840，P=0.112)，多因素Logistic回歸校正性別和年齡后結(jié)果:加性模型，肺結(jié)核組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1

13、.925，95％ CI:1.207-3.070，P=0.006);顯性模型，肺結(jié)核組SLC11A1基因D543N位點(diǎn)基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=1.934,95％ CI:1.217-3.075, P=0.005)。
　　5、按性別進(jìn)行分層，用多因素Logistic回歸校正年齡后分析:顯性模型，SLC11A1基因D543N位點(diǎn)病例組男性基因型AG+AA頻率高于對(duì)照組(OR=1.722，95％ CI:1.053-2.81

14、7，P=0.030)，病例組女性基因型AG+AA頻率高于對(duì)照組(OR=3.371，95％ CI:1.557-7.296，P=0.002)。結(jié)腦組女性基因型AG+AA頻率明顯高于對(duì)照組(OR=6.064，95％ CI:2.207-16.657，P＜0.001)。肺結(jié)核組男性基因型AG+AA頻率高于對(duì)照組(OR=1.802,95％ CI:1.049-3.096, P=0.033)。
　　6、結(jié)腦組和肺結(jié)核組同時(shí)和對(duì)照組比較，用多元Lo

15、gistic回歸校正年齡和性別后分析:結(jié)腦組基因型AG頻率和疾病易感性關(guān)系(OR=2.725，95％ CI:1.612-4.606，P＜0.001)明顯高于肺結(jié)核組(OR=1.885，95％ CI:1.208-2.942, P=0.005)。
　　結(jié)論:
　　1、SLC11A1基因D543N位點(diǎn)A等位基因頻率增高可能增加結(jié)核病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。
　　2、SLC11A1基因D543N位點(diǎn)突變基因型AG對(duì)結(jié)腦的易感性強(qiáng)于肺結(jié)核。