低溫聯(lián)合高濃度的丙酮酸對排卵后卵母細(xì)胞老化的抑制作用.pdf

1、小鼠卵母細(xì)胞排卵后停留在MII期，只有正常受精或有適當(dāng)刺激孤雌激活后才恢復(fù)減數(shù)分裂。若MII卵母細(xì)胞不受精或激活，就會發(fā)生老化。老化卵母細(xì)胞的主要特征是MPF活性下降，孤刺激活敏感性增加，發(fā)育能力下降。與輸卵管內(nèi)滯留一樣，體外成熟卵母細(xì)胞也發(fā)生老化。然而，包括顯微操作和體外受精在內(nèi)的很多研究在操作前都往往需要對成熟卵母細(xì)胞進(jìn)行一段培養(yǎng)，有可能會導(dǎo)致卵母細(xì)胞老化而降低發(fā)育能力。所以，我們必須找到合適的方法來抑制卵母細(xì)胞老化。本實驗室已證明

2、丙酮酸在抑制卵母細(xì)胞老化中起著重要作用。低溫能夠降低細(xì)胞代謝水平，因此我們認(rèn)為低溫對卵母細(xì)胞的老化可能具有抑制作用。我們研究了溫度和丙酮酸相互作用對小鼠卵母細(xì)胞老化的抑制作用。結(jié)果表明： 1、在相同溫度下，高濃度丙酮酸(10.27mM或5.27mM)能明顯抑制卵母細(xì)胞孤雌激活敏感性的增加。 2、在相同丙酮酸濃度下，溫度越低卵母細(xì)胞孤雌激活敏感性增加得越慢(5℃<15℃<25℃<37℃)。 3、在各溫度下高濃

3、度丙酮酸都能顯著提高老化卵母細(xì)胞的胚胎發(fā)育能力(10.27mM>5.27mM>0.27mM)。25℃和15℃，卵母細(xì)胞在高濃度(10.27mM)丙酮酸中老化24h，胚胎發(fā)育能力與37℃、低濃度(0.27mM)丙酮酸中老化6h差異不顯著。 4、在高濃度丙酮酸中老化24h，25℃受精率比15℃受精率顯著降低。 5、5℃低溫下老化24h卵母細(xì)胞微管解聚，并且不能恢復(fù)。 6、高丙酮酸25℃老化24h，透明帶發(fā)生硬化