細(xì)菌DNA磷硫?；揎椗c限制.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文細(xì)菌DNA磷硫?；揎椗c限制姓名：徐鐵剛申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：周秀芬20090401上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文細(xì)菌DNA磷硫酰化修飾與限制株)的染色體上，得到工程菌株XTGl5，分析了它們的Dnd表型。dndA，C，D，E的同框缺失導(dǎo)致了Dnd表型的喪失，幽扭的同框缺失卻加重了Dnd表型。相應(yīng)基因的表達(dá)質(zhì)?；匮a到這些工程菌株中能夠恢復(fù)原來的Dnd表型，說明dndA，c，口E是DNA磷硫酰化修飾所

2、必需的，而dndB可能起到調(diào)控的作用。通過誘導(dǎo)表達(dá)這些蛋白來研究它們對生物體的影響，與DndA，DndB，DndE不同，過量的DndC和DndD會造成菌株完全停止生長，說明整個dnd基因簇是通過五個蛋白嚴(yán)格控制、協(xié)調(diào)作用來完成DNA磷硫?；揎椆δ艿摹Ｉ钊胙芯縎almonellaentericaserovarCerro87中的DNA磷硫?；F(xiàn)象。發(fā)現(xiàn)它同樣具有Dnd表型并且DNA降解程度高于變鉛青鏈霉菌，說明Salmonellaente

3、ricaserovarCerro87中的DNA發(fā)生了高度的DNA磷硫?；揎棥Ｍㄟ^dnd同源基因保守區(qū)域設(shè)計簡并引物克隆賦予SalmonellaentericaserovarCerro87中Dnd表型的sed基因簇，該基因簇與變鉛青鏈霉菌的dnd基因簇不同，它不含有變鉛青鏈霉菌中參與DNA硫修飾所必須的咖剃的同源基因，而只含有幽抬坷的同源基因SedBE。攜帶這個基因簇的質(zhì)粒pJTUl238可以在EcoliDH5a中成功地磷硫?；拗骷捌?/p>