噬菌體在血液中的失活及其機理研究.pdf

1、目的：噬菌體文庫常常用來確定與特定分子結(jié)合的短肽，而噬菌體展示技術(shù)作為一種日益重要的技術(shù)在體內(nèi)研究中已得到廣泛應(yīng)用。我們在利用噬菌體PHD-C7C文庫進行鼻腔給藥以尋找可通過血腦屏障的短肽時，發(fā)現(xiàn)了噬菌體在體內(nèi)的失活現(xiàn)象。之后，我們對這一現(xiàn)象進行了更為細致的定量研究，并初步探討了血液中影響噬菌體活性的因素及其作用機理，為噬菌體在體內(nèi)作為治療或診斷的可能應(yīng)用以及動物體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)的進一步完善提供理論基礎(chǔ)。 方法：檢測了不同時

2、間梯度時M13噬菌體在血清和全血中的殘余活性，進行了體內(nèi)實驗，然后比較了幾種情況下噬菌體在血液中的失活現(xiàn)象(注射免疫抑制劑與否、KSCN洗脫與否、免疫缺陷型小鼠、體溫或補體失活的高溫)，并初步探討了噬菌體失活問題的解決辦法。 結(jié)果：血清造成噬菌體快速失活，KSCN及環(huán)磷酰胺處理可部分逆轉(zhuǎn)該效應(yīng)，60℃處理基本上完全消除該失活現(xiàn)象。T細胞缺陷型裸鼠和普通小鼠的失活效應(yīng)相似。胰蛋白胨和牛血清白蛋白可部分解除血清對噬菌體的失活作用。