硫酸酯化黑木耳NTAAP多糖片段與松多酚協(xié)同抗氧化研究.pdf

1、機(jī)體氧化作用是引發(fā)如癌癥、動脈硬化、心腦血管等相關(guān)疾病的主要誘因之一。因此對抗氧化劑的研究與開發(fā)一直備受關(guān)注。由于機(jī)體內(nèi)的抗氧化作用途徑復(fù)雜且多變，單一的抗氧化劑很難達(dá)到理想的抗氧化效果。為了提高現(xiàn)有抗氧化劑的高效性，本研究選擇了具有大量多糖類物質(zhì)的黑木耳和富含多酚類化合物的紅松樹皮作為主要原料，將黑木耳多糖分成多個片段進(jìn)行活性跟蹤，并對體現(xiàn)出具有較高抗氧化活性的分級多糖進(jìn)行硫酸化修飾，再將黑木耳分級多糖和硫酸化多糖片段分別與紅松多酚進(jìn)

2、行聯(lián)合使用，通過體外和體內(nèi)實驗對聯(lián)合用藥進(jìn)行抗氧化分析。具體內(nèi)容與研究結(jié)果如下：
　　1.選用三種不同溶液（純水、0.1mol/L的鹽酸和0.1mol/L氫氧化鈉）浸提提取黑木耳多糖，再將提取出的黑木耳多糖用不同濃度乙醇沉淀出不同的黑木耳分級多糖，并對各分級多糖進(jìn)行體外抗氧化活性分析。得出結(jié)論:NTAAP90％的體外抗氧化活性最強(qiáng)。
　　2.采用濃硫酸法對選出的最佳分級多糖片段進(jìn)行分子修飾，并優(yōu)化出制備硫酸化黑木耳多糖的最佳

3、工藝條件，根據(jù)優(yōu)化工藝結(jié)果選擇制備條件為:反應(yīng)時間1h，反應(yīng)溫度-2℃，反應(yīng)試劑比例為1∶3，得到硫酸化多糖取代度為0.5170。并經(jīng)紅外光譜顯示，NTAAP90％經(jīng)過硫酸化成功接上硫酸基團(tuán)。
　　3.分別測得單獨(dú)作用時的體外抗氧化指標(biāo)（ABTS自由基清除活性、OH自由基清除活性、超氧自由基的清除活性以及脂質(zhì)過氧化的抑制活性）的IC50值，以組成復(fù)配組的活性物質(zhì)的IC50值的比值作為參考，選擇50∶1、100∶1、150∶1三個比

4、例作為ComboNP和ComboSP的相互作用分析。用藥物聯(lián)合分析軟件“CompuSyn”處理得到結(jié)果:ComboNP的ABTS自由基清除活性的測定顯示為拮抗作用，對超氧自由基的清除活性和對脂質(zhì)過氧化的抑制活性體現(xiàn)出了輕度的協(xié)同效果。而ComboSP顯現(xiàn)出較好的清除ABTS自由基和超氧自由的協(xié)同效果，并在抑制脂質(zhì)過氧化活性方面體現(xiàn)出，其相互作用與SNTAAP90％和PP的比例有明顯的關(guān)聯(lián)，在SNTAAP90％和PP以150∶1的比例復(fù)配

5、時，ComboSP呈現(xiàn)出強(qiáng)協(xié)同作用。
　　4.通過對小鼠采用60Co-γ射線輻射，建立氧化損傷模型，研究ComboSP對小鼠抗氧化體內(nèi)網(wǎng)絡(luò)作用。結(jié)果顯示ComboSP能夠有效的阻止DNA彌散，并降低小鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的水平，增強(qiáng)了抗氧化物質(zhì)（GSH、VE、VC和COQ10）的合成與再生。表明了ComboSP能夠?qū)﹄婋x輻射損傷進(jìn)行有效的防護(hù)。
　　本研究將自身具有一定抗氧化能力的黑木耳分級多糖進(jìn)行硫酸酯化修飾，再將硫