齊拉西酮對LPS引起的小膠質細胞活化作用的研究.pdf

1、背景：精神分裂癥是一種致殘性極高的慢性重性精神疾病，人群終生患病率近1％，其病理機理至今仍未明確。研究顯示，神經元的毒性損害與精神分裂癥大腦結構變化和病程進展有關，而氧化應激啟動的小膠質細胞活化，產生大量致炎性自由基、細胞因子等可以對神經元造成直接的毒性損害。誘導性NO合酶（iNOS）和NADPH氧化酶（NOX2）是小膠質細胞氧化應激的關鍵酶，iNOS和NOX2的激活可以產生一系列細胞因子從而對神經元產生損傷，抑制這兩個關鍵酶的表達和激

2、活可以抑制小膠質細胞的活化從而對神經元細胞產生保護作用。
　　目的：通過利用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）建立小膠質細胞在體和離體炎癥模型，聚焦于小膠質細胞活化的關鍵酶iNOS和NOX2及其活化后的氧化應激產物，來探討在體和離體中非典型抗精神病藥物對活化小膠質細胞活化的作用并探索其作用的機制。
　　方法：1、通過腹腔注射LPS建立在體動物腦內系統(tǒng)炎癥模型；2、運用ELISA法檢測齊拉西酮對離體小膠質活

3、化后NO表達的作用。3、通過免疫印跡法（Western blot）檢測不同濃度齊拉西酮對在體和離體小膠質細胞誘導性一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達的作用；4、通過western blot的方法檢測齊拉西酮對在體小膠質細胞NOX2亞單位gp91phox表達的影響。5、通過Oxyblot方法檢測藥物對在體和離體小膠質細胞蛋白氧化（蛋白羰基化水平）的作用；6、通過實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢測齊拉西酮對在體和離體小膠質細胞iNOS m

4、RNA的作用。
　　結果：在體部分：1、LPS引起紋狀體部位 iNOS表達的升高；2、LPS引起的紋狀體部位iNOS的升高可以被齊拉西酮抑制而不能被舒必利抑制。3、LPS對紋狀體部位NOX2亞單位gp91phox的表達無明顯作用。4、齊拉西酮能抑制LPS引起的蛋白羰基化產物的升高。5、齊拉西酮能抑制LPS引起的iNOS mRNA的升高。離體部分：1、齊拉西酮可以抑制LPS引起小膠質細胞活化所釋放的NO量；2、齊拉西酮可以抑制LPS

5、引起的BV-2小膠質細胞內iNOS以及iNOS mRNA的表達增高。3、齊拉西酮能抑制BV-2小膠質細胞活化后細胞蛋白羰基化產物的升高。4、、LPS和齊拉西酮對BV-2小膠質細胞NOX2亞單位gp91phox的表達無明顯作用。
　　結論：非典型抗精神病藥物可以通作用于小膠質細胞的兩個關鍵酶 iNOS以及NOX2來抑制小膠質細胞的活化，從而對神經元產生保護作用,但其作用機制尚需進一步探索。
　　意義：我們對于非典型抗精神病藥物