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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究細(xì)辛、附子及配伍的含藥血清對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞L型鈣通道的影響,并初步探討其抗BA的作用機(jī)制。
方法:細(xì)辛、附子及配伍水煎后水浴濃縮成1:1,給予大鼠灌胃,每次2.5g·kg-1,7d后制備含藥血清;采用急性酶解法獲得大鼠心室肌細(xì)胞,用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄加入細(xì)辛、附子及配伍含藥血清后心室肌細(xì)胞L型鈣通道的電流,電流信號(hào)經(jīng)膜片鉗放大器放大,濾波處理,經(jīng)pClamp10.0軟件采集電流變化,Clampfit軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理
2、。實(shí)驗(yàn)方案依據(jù)心室肌L型鈣通道特點(diǎn)設(shè)計(jì)激活、失活和恢復(fù)刺激方案。根據(jù)所記錄電流圖繪制激活、失活和恢復(fù)曲線,分析細(xì)辛、附子及配伍含藥血清對(duì)心室肌細(xì)胞L型鈣通道的影響。
結(jié)果:(1)峰值電流顯示:空白組、細(xì)辛組、附子組及配伍組的平均激活率分別為(12.87±0.25)%(n=8,p<0.05)、(28.36±0.37)%(n=8,p<0.05)、51.17±0.25)%(n=8,p<0.01)和(75.07±0.28)%(n=8,
3、P<0.01);(2)電流-電壓(I-V)曲線顯示:空白、細(xì)辛、附子及配伍組均使I-V曲線明顯下移,且細(xì)辛配伍附子組激活峰電流值更強(qiáng);(3)穩(wěn)態(tài)激活曲線顯示:隨著細(xì)辛組、附子組和細(xì)辛配伍附子組的加入,其穩(wěn)態(tài)激活曲線都左移,對(duì)鈣通道的開放具有促進(jìn)作用;(4)穩(wěn)態(tài)失活曲線顯示:隨著細(xì)辛組、附子組和細(xì)辛配伍附子組的加入,其穩(wěn)態(tài)失活曲線都左移,加速了L型鈣通道失活;(5)穩(wěn)態(tài)失活后恢復(fù)曲線顯示:隨著細(xì)辛組和附子組的加入,其穩(wěn)態(tài)失活后恢復(fù)曲線無明
4、顯影響,但是隨著細(xì)辛配伍附子組的加入,其穩(wěn)態(tài)失活后恢復(fù)的時(shí)間延長(zhǎng)。
結(jié)論:(1)細(xì)辛含藥血清使激活曲線、失活曲線左移,對(duì)恢復(fù)曲線無明顯作用;附子含藥血清使激活曲線、失活曲線左移,對(duì)恢復(fù)曲線無明顯作用;細(xì)辛配伍附子含藥血清使激活曲線、失活曲線左移,使恢復(fù)時(shí)間縮短。(2)細(xì)辛配伍附子含藥血清對(duì)心室肌細(xì)胞L型鈣通道的激活作用強(qiáng)于單位細(xì)辛、附子,表明二藥配伍有相須增效的效果。細(xì)辛配伍附子治療BA的作用機(jī)制可能與激活L型鈣通道,降低閾電
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