毛杭子梢抗H5N1病毒活性成分研究.pdf

1、自1997年首次報(bào)道人類感染H5N1禽流感病毒以來，據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，截止至2014年7月，人感染H5N1禽流感將近700人，且死亡率高達(dá)60％。由于其變異性和耐藥性，目前尚未有相應(yīng)的高效藥物用于臨床。因天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)具有新穎性，從中草藥中尋找有抗病毒活性的化合物，日趨受到重視。課題組前期以80多種中草藥作為篩選對象，篩選出幾種具一定抗H5N1病毒活性的中草藥。根據(jù)活性的強(qiáng)弱，本課題選取了毛杭子梢作為研究對象，對其活性部60％醇提物的乙酸乙酯

2、萃取部位進(jìn)行系統(tǒng)研究。
　　毛杭子梢(Campylotropis hirtella(Franch.)Schindl），俗稱大和紅、銹釘子、油根、扁皂角，為豆科植物杭子梢屬植物，以根入藥，其藥材又名大紅袍(RadixCampylotropis hirtella(Franch.)Schindl）。廣泛分布于我國云南、貴州和四川等省，具有調(diào)經(jīng)活血，止痛，收斂的功效。用于閉經(jīng)，痛經(jīng)，白帶，胃痛;外用治黃水瘡，燒燙傷，根研粉外用于止血;以及

3、胃和十二指腸潰瘍《民族藥志三》。其化學(xué)成分主要有木脂素、香豆素類、黃酮類、鞣質(zhì)等。
　　利用重結(jié)晶、硅膠柱色譜、ODS、Sephadex LH-20等色譜技術(shù)對毛杭子梢根60％乙醇提取物進(jìn)行系統(tǒng)分離純化，共得到29個(gè)單體化合物，并通過理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)，鑒定了其中25個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為:紅花巖黃芪香豆雌酚Ⅰ(1)，4'，6'，7-三羥基-2'-甲氧基-3-苯基香豆素(2)，紅花巖黃芪香豆雌酚B(3)，isotrifoliol(

4、4)，槲皮素(5)，山奈酚(6)，二氫山奈酚(7)，(2R,3S)-3',4'，3，5，7-五羥基黃烷(8)，傘形花內(nèi)酯(9)，秦皮甲素(10)，薯蕷皂苷元(11)，蘆丁(12)，槐角苷(13)，大豆黃素(14)，香豌豆酚(15)，阿魏酸(16)，麥芽酚(17)，水楊酸(18)，1，3-二羥基蒽醌(19)，(2R,3R)-3，4'-二羥基-7-甲氧基-8-甲基黃烷(20)，胡蘿卜苷(21)，β-谷甾醇(22)，(2R)-4'，7-二羥基

5、黃烷(23)，3，4-二羥基苯甲酸(24)，4-羥基苯甲酸(25)。其中化合物1和2為新化合物;化合物3、4、10、13、15、19、20、23為首次從該屬中分離得到。
　　以H5N1病毒感染MDCK細(xì)胞為篩選模型，采用細(xì)胞病變效應(yīng)觀察法(CPE法)對毛杭子梢根總提物和各部位萃取物以及得到的單體化合物進(jìn)行抗H5N1病毒活性評價(jià)。結(jié)果顯示，毛杭子梢根總提物對H5N1病毒在150μg/mL水平有一定的抑制活性，乙酸乙酯部位和正丁醇部位