UGT1A1-28及UGT1A1-6基因單核苷酸多態(tài)性與伊立替康化療毒性反應(yīng)關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景及目的:胃腸道惡性腫瘤是較常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率及死亡率極高，具有易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。在中國(guó)本病的早期發(fā)現(xiàn)及診斷率較低，許多患者在發(fā)現(xiàn)原發(fā)腫瘤時(shí)就已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，大部分屬于進(jìn)展期惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移病例。這類(lèi)患者的五年生存率比較低，根治性手術(shù)后常需予以相應(yīng)的輔助化學(xué)治療。因此，胃腸道惡性腫瘤患者目前主要采取以根治性手術(shù)后輔以化學(xué)藥物治療的綜合治療方案。自20世紀(jì)90年代初以來(lái)，以氟尿嘧啶(Fluorouracil，5-FU)加亞葉

2、酸鈣(Calcium Folinate，CF)組合為主的化學(xué)治療方案逐漸成為了胃腸道惡性腫瘤化療的一線方案，然而其療效尚不令人滿意。數(shù)十年來(lái)人們經(jīng)過(guò)艱辛的探索，開(kāi)發(fā)出了許多新型抗惡性腫瘤的藥物，使胃腸道惡性腫瘤的化療取得了較大進(jìn)展。近年來(lái)研制出的一類(lèi)新的具有細(xì)胞毒性的抗惡性腫瘤藥物，即喜樹(shù)堿類(lèi)衍生物，鹽酸伊立替康注射液(Irinotecan，CPT-11)即為其代表之一。此藥的出現(xiàn)使胃腸道惡性腫瘤患者的治療效果有了巨大的改善，延長(zhǎng)了病人

3、的生存期，提高了五年生存率。伊立替康是一種半合成的可溶性喜樹(shù)堿衍生物，經(jīng)靜脈注入人體后在具有較高親和力的羧酸酯酶(Carboxylesterases，CES)的催化下轉(zhuǎn)變?yōu)?-乙基-10-羥基喜樹(shù)堿(7-ethyl-10-hydroxy camptothecin，SN-38)，從而使其抗癌活性明顯增強(qiáng)。進(jìn)而通過(guò)與DNA及拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(TopoisomeraseⅠ，TOPOⅠ)形成化學(xué)復(fù)合物，再作用于拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ使其活性減弱，影響DNA的

4、復(fù)制以及轉(zhuǎn)錄等生命過(guò)程，從而發(fā)揮它的抗癌活性。SN-38在發(fā)揮抗腫瘤活性后，由尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶1A1(Uridine-diphosphoglucuronosyl transferase1A1，UGT1A1)在肝內(nèi)崔化反應(yīng)后轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟侨┧峄腟N-38（即SN-38G），從而失去活性。由此可見(jiàn)，拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ是CPT-11的靶酶，而UGT1A1則是CPT-11代謝的關(guān)鍵酶。所以理論上UGT1A1基因單核苷酸多態(tài)性(Single

5、 nucleotidepolymorphism，SNP)突變將影響其活性以及表達(dá)水平，從而影響伊立替康在體內(nèi)的代謝，因此與它的療效及毒性反應(yīng)密切相關(guān)。而嚴(yán)重的骨髓抑制如粒細(xì)胞減少以及嚴(yán)重延遲性腹瀉為伊立替康主要的毒性反應(yīng)?，F(xiàn)進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)為探究伊立替康的嚴(yán)重毒性反應(yīng)與UGT1A1*6及UGT1A1*28基因的單核苷酸多態(tài)性突變的關(guān)系，尋找伊立替康化療毒性反應(yīng)分子生物學(xué)標(biāo)志物，為個(gè)體化化學(xué)治療方案的確立提供理論依據(jù)。
　　方法:選取20

6、14年5月至2015年10月于瀘州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院胃腸外科就診，并經(jīng)術(shù)后病理組織檢查診斷為進(jìn)展期胃腸道惡性腫瘤患者100例，分為伊立替康化療組（FOLFIRI組）和奧沙利鉑化療組(FOLFOX組)，每組納入研究患者50例。術(shù)后第一次化學(xué)藥物治療之前采集所有患者外周靜脈血2ml，并凍存于-70℃冰箱備用。通過(guò)PCR檢測(cè)UGT1A1*28及UGT1A1*6基因多態(tài)性。伊立替康化療組共納入50例患者，予以FOLFIRI（亞葉酸鈣+氟尿嘧啶+

7、鹽酸伊立替康）方案進(jìn)行化學(xué)治療。奧沙利鉑化療組共納入患者50例，予以FOLFOX（亞葉酸鈣+氟尿嘧啶+奧沙利鉑）組合化療。觀察并記錄患者在化學(xué)治療過(guò)程中發(fā)生的毒性反應(yīng)及化學(xué)治療前的轉(zhuǎn)氨酶及總膽紅素水平。統(tǒng)計(jì)并分析患者化學(xué)治療中發(fā)生的毒性反應(yīng)，化學(xué)治療前轉(zhuǎn)氨酶及總膽紅素水平與UGT1A1*6及UGT1A1*28基因單核苷酸多態(tài)性突變之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:100例患者中UGTIA1*28野生型(TA)6/(TA)6共77例，化療前總

8、膽紅素水平為14.1±17.1umol/L;轉(zhuǎn)氨酶水平為AST:14.36±17.01 U/L，ALT:13.90±17.60 U/L。雜合突變型(TA)6/(TA)7和純合突變型(TA)7/(TA)7共23例，化療前總膽紅素水平為13.9±5.9umol/L;轉(zhuǎn)氨酶水平為AST:14.09±4.96 U/L，ALT:13.70±5.63 U/L。兩組間化療前總膽紅素水平及轉(zhuǎn)氨酶ALT，AST無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。UGT1A1*6野生型G/G共

9、59例，化療前總膽紅素水平15.0±19.4umol/L;轉(zhuǎn)氨酶水平為AST:15.64±19.22 U/L，ALT:15.24±19.90 U/L。UGT1A1*6雜合子G/A和純合子A/A型基因單核苷酸突變共41例，化療前總膽紅素水平12.6±5.3umol/L;轉(zhuǎn)氨酶水平，AST:12.37±4.60U/L，ALT:11.85±4.92U/L。兩組間化療前總膽紅素水平及轉(zhuǎn)氨酶水平差異仍無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。UGT1A1*6突變率高于UGT

10、1A1*28，P＜0.01。FOLFIRI組發(fā)生3級(jí)以上延遲性腹瀉共8例，外周神經(jīng)損害共3例。FOLFOX組發(fā)生外周神經(jīng)損害共12例，發(fā)生3級(jí)以上腹瀉1例。FOLFIRI組3級(jí)以上血紅蛋白減低1例，F(xiàn)OLFOX組1例。兩組均未發(fā)現(xiàn)3級(jí)以上血小板降低，中性粒細(xì)胞減少及白細(xì)胞下降。兩組比較FOLFIRI主要毒性反應(yīng)為3級(jí)以上延遲性腹瀉，而FOLFOX組主要毒性反應(yīng)為外周神經(jīng)損害。FOLFIRI組內(nèi)無(wú)突變UGT1A1*6(G/G)野生型個(gè)體共

11、30例，只有1例發(fā)生3級(jí)以上延遲性腹瀉;突變型G/A或A/A共20例，其中7例發(fā)生3級(jí)以上延遲性腹瀉，兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。野生型UGT1A1*28(TA)6/(TA)6共39例，其中發(fā)生3例發(fā)生3級(jí)以上延遲性腹瀉;突變型(TA)6/(TA)7或(TA)7/(TA)7共11例，其中3級(jí)以上延遲性腹瀉共5例，兩者間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。
　　結(jié)論:①.FOLFIRI化學(xué)治療方案的主要嚴(yán)重毒性反應(yīng)為3級(jí)

12、以上延遲性腹瀉，而FOLFOX化療方案主要嚴(yán)重毒性反應(yīng)則為周?chē)窠?jīng)毒性。②.中國(guó)漢族人中UGT1A1*6基因的單核苷酸多態(tài)性突變頻率較UGT1A1*28更高。③.UGT1A1*28及UGT1A1*6基因突變雜合子或純合子個(gè)體應(yīng)用伊立替康化療后嚴(yán)重延遲性腹瀉發(fā)生率增加;但嚴(yán)重骨髓抑制效應(yīng)如白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞降低的發(fā)生率不增加。④.UGT1A1*28及UGT1A1*6基因多態(tài)性不會(huì)引起患者使用含伊立替康的化療方案后總膽紅素水平及轉(zhuǎn)氨酶水平的