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文檔簡介
1、目的:觀察丹酚酸對慢性溫和應激所致的大鼠抑郁樣行為的影響及應激后外周血和右側海馬相對端粒長度變化。
方法:將92只健康雄性,體質量在110-150g的清潔級Sprague Dawley大鼠按照隨機數(shù)字法分為5組,即非應激+生理鹽水組(對照組)1個,19只;應激+生理鹽水組干預,19只;其他研究組分別為應激+氟西汀干預(氟西汀組),18只;應激+丹參多酚酸干預(丹酚酸組),20只;應激+氟西汀+丹酚酸干預(聯(lián)合組),16只。除對
2、照組外,其余4組進行慢性溫和應激造模。每日采用2種應激方法,同種應激不能連續(xù)出現(xiàn),平均每種刺激被采用3次,使動物不能預料應激的發(fā)生,對照組不接受任何實驗應激源,連續(xù)應激21天,建立抑郁模型。造模成功后,應激各組每日不定時繼續(xù)給予以上應激,且每天下午各組分別腹腔注射相對應的丹參多酚酸40 mg/kg,氟西汀20 mg/kg,生理鹽水,丹酚酸40 mg/kg+氟西汀20 mg/kg,體積體質量比10 ml/kg,每周固定時間進行蔗糖偏愛實驗
3、,記錄大鼠蔗糖和水消耗量,統(tǒng)計蔗糖偏好率(G,%),糖水偏好率=蔗糖水消耗量/(蔗糖水消耗量+純水消耗量)×100%。稱體質量,統(tǒng)計其體質量增長率(K,%),即應激3周后體質量增長率=(應激后體質量-應激前1周體質量)/應激后體質量×100%;給藥3周后體質量增長率=(給藥后體質量-應激3周后體質量)/給藥后體質量×100%。給藥3周后進行強迫游泳測試,Morris水迷宮測試(Morris Water Maze, MWM)。本實驗數(shù)據(jù)采
4、用SPSS19.0進行統(tǒng)計學處理,大鼠體質量(g)、蔗糖偏好率(G,%)、強迫游泳后4分鐘靜止不動時間(T4,單位:s)、水迷宮前5天的平均逃避潛伏期(s)及第6天的穿越平臺象限(s)、大鼠的全血相對端粒長度數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x?s)表示,大鼠右側海馬相對端粒長度采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距),Median(Interquartile range),即M(IQR)表示,檢驗水準為0.05。對5組的大鼠的基線水平的體質量(g)、應激3周后與
5、給藥3周后體質量增長率(K,%)、蔗糖偏好率、強迫游泳后4分鐘靜止不動時間( T4,單位: s)、大鼠的全血相對端粒長度進行單因素方差分析和Bonferroni法兩兩比較,水迷宮前5天大鼠的平均逃避潛伏期進行重復測量分析。水迷宮第6天大鼠穿越平臺象限時間(單位: s)采用進行單因素方差分析和Bonferroni法兩兩比較。對應激3周后和給藥3周后水迷宮第6天各組大鼠穿越平臺象限時間進行配對t檢驗。大鼠右側海馬相對端粒長度采用Kruska
6、l Walli檢驗,Nemenyi檢驗用于右側海馬相對端粒長度組間兩兩比較。
結果:
1、基線水平時:5組的體質量和蔗糖偏好率差異沒有統(tǒng)計學意義(F=1.412, P=0.237;F=2.175, P=0.078)。
2、慢性溫和應激建立抑郁大鼠模型,應激3周后,5組大鼠的體質量增長率差異有統(tǒng)計學意義(F=10.775, P<0.001),對照組、氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組與生理鹽水組相比較,K有差異,且差
7、異有統(tǒng)計學意義(均P<0.001);應激3周后,5組的蔗糖偏好率分別為:生理鹽水組:(43.95±12.38)%,氟西汀組:(48.56±12.25)%,丹酚酸組:(48.00±10.33)%,聯(lián)合組:(45.31±10.17)%,對照組:(67.37±13.02)%。5組比較蔗糖偏好率的差異有統(tǒng)計學意義(F=12.453,P<0.001),對照組的蔗糖偏好率高于其他組(均P<0.001);應激3周后各組大鼠T4分別為,生理鹽水組:(3
8、2.55±10.54)s,氟西汀組:(31.93±13.99)s,丹酚酸組:(34.72±10.66)s,聯(lián)合組:(35.02±12.75)s,對照組:(18.68±5.28) s,5組比較 T4有差異,且差異有統(tǒng)計學意義(F=4.777,P=0.002),應激各組T4高于對照組(均P<0.05);應激3周后大鼠水迷宮測試前5天數(shù)據(jù)重復測量分析顯示各處理組間平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計學意義(F=5.732, P<0.001),測量時間之間
9、差異有統(tǒng)計學意義(F=136.000, P<0.001),處理組和測量時間對大鼠的水迷宮結果差異無統(tǒng)計學意義(F=1.964, P=0.061)。多變量方差分析顯示:應激第1天,各組間比較差異無統(tǒng)計學意義(F=0.272, P>0.05),應激第2-5天,各組大鼠平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計學意義(F分別為15.148,6.632,2.009,2.743,均P<0.05)。其中應激第2天,經(jīng)Bonferroni兩兩比較得到,應激4組平均逃避
10、潛伏期均值高于對照組(均P<0.05)。應激4組之間分別比較,其平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。應激3周后5組大鼠的水迷宮第6天穿越平臺象限時間進行單因素方差分析顯示,各組間差異有統(tǒng)計學意義(F=19.233, P<0.001)。經(jīng)Bonferroni兩兩比較得到,應激4組大鼠的穿越平臺象限時間低于對照組(均P<0.001)。應激4組大鼠兩兩比較穿越平臺象限時間差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
3、給藥3
11、周后:5組大鼠的體質量增長率(K)有差異,其中生理鹽水組:(11.17±4.65)%,氟西汀組:(22.34±6.70)%,丹酚酸組:(19.11±4.76)%,聯(lián)合組:(21.58±7.25)%,對照組:(19.67±6.67)%,且差異有統(tǒng)計學意義(F=10.084, P<0.001),氟西汀組與丹酚酸、聯(lián)合組分別比較,體質量增長率差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05),氟西汀組K高于生理鹽水組,K差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001);丹
12、酚酸與聯(lián)合組、對照組分別比較差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05),丹酚酸組體質量增長率高于生理鹽水組,其差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);聯(lián)合組與丹酚酸組比較,體質量增長率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),聯(lián)合組與生理鹽水組比較,體質量增長率差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.001);給藥3周后,蔗糖偏好測試:5組的蔗糖偏好率(G)有統(tǒng)計學差異(F=18.809, P<0.001)。氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組與對照組的G差異無統(tǒng)計學意義(P均
13、>0.05)。生理鹽水組的大鼠G低于其他4組(均P<0.001)。給藥3周后強迫游泳測試:給藥3周后,5組大鼠的T4差異有統(tǒng)計學意義(F=6.137, P<0.001),氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組的 T4分別與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05),生理鹽水組的T4高于對照組(P<0.001)。氟西汀組與丹酚酸組、聯(lián)合組比較差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05);給藥3周后Morris水迷宮測試(MWM)顯示,前5天5組大鼠平均逃避潛
14、伏期差異有統(tǒng)計學意義(F=16.243, P<0.001),測量時間之間差異有統(tǒng)計學意義(F=9.359, P<0.001)。多變量方差分析顯示:給藥第1-5天,各組大鼠平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計學意義(F分別為6.762,7.248,3.923,8.145,4.678;均P<0.01),其中給藥第1天,經(jīng)過Bonferroni兩兩比較得到,對照組與丹酚酸組、氟西汀組、聯(lián)合組之間平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05),而對照組與
15、生理鹽水組平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。生理鹽水組平均逃避潛伏期時間高于其他4組(均P<0.001)。5組的水迷宮測試第6天大鼠穿越平臺象限時間差異有統(tǒng)計學意義(F=14.499, P<0.001)。經(jīng)過Bonferroni兩兩比較得到,對照組與氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組大鼠的穿越平臺象限時間差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。生理鹽水組穿越平臺象限時間低于其他各組(均P<0.05),聯(lián)合組穿越平臺象限時間高于丹酚酸組
16、,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
給藥3周后,各組間全血相對端粒長度差異有統(tǒng)計學意義(F=18.910, P<0.001)。經(jīng)Bonferroni兩兩比較,氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組、對照組的全血相對端粒長度均值高于于生理鹽水組(均 P<0.001)。采用Kruskal Wallis檢驗對大鼠右側海馬相對端粒長度進行分析(χ2=12.004, P<0.05)。用Nemenyi檢驗進行兩兩比較,對照組、氟西汀組、丹酚酸組的
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