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文檔簡介
1、目的:
研究重組腺病毒H101和索拉非尼(sorafenib)單藥或兩藥聯(lián)合對人肝細(xì)胞癌細(xì)胞株HepG2和Hep3B增殖及凋亡的影響,并初步探討其相關(guān)作用機(jī)制。
方法:
將重組腺病毒H101和索拉非尼以單藥及聯(lián)合的方式分別作用于人肝癌細(xì)胞株HepG2和Hep3B,另設(shè)不加藥對照組,CCK-8法檢測細(xì)胞存活率,AnnexinⅤ-PI流式細(xì)胞術(shù)及DAPI染色檢測細(xì)胞凋亡。流式細(xì)胞術(shù)檢測索拉非尼處理后人肝癌細(xì)胞株
2、HepG2和Hep3B對攜帶綠色熒光蛋白的非復(fù)制型腺病毒(Ad-GFP)敏感性變化。蛋白印跡法(Western blot)檢測索拉非尼處理后人肝癌細(xì)胞株HepG2和Hep3B的柯薩奇-腺病毒受體(CAR)、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(pERK)蛋白表達(dá)水平變化。
結(jié)果:
1、重組腺病毒H101和索拉非尼單藥均可顯著抑制人肝癌細(xì)胞株HepG2和Hep3B增殖(P<0.05)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;且
3、與H101、索拉非尼單藥相比,兩藥聯(lián)合作用更為顯著(P<0.05)。
2、低濃度索拉非尼在抑制Raf/MEK/ERK信號傳導(dǎo)途徑活性的同時,可上調(diào)人肝癌細(xì)胞株HepG2和Hep3B表面CAR的表達(dá),增加腫瘤細(xì)胞對腺病毒敏感性。
結(jié)論:
重組腺病毒H101、索拉非尼單藥及兩藥聯(lián)合均能抑制HepG2和Hep3B細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡,且在特定濃度范圍內(nèi)兩藥聯(lián)合對細(xì)胞增殖存在協(xié)同抑制作用。其作用機(jī)制可能與索拉非尼通
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