化濁解毒軟堅方對肝癌荷瘤小鼠組織生長與轉(zhuǎn)移影響的實驗研究.pdf

1、目的:采用細(xì)胞接種的方法建立H22肝癌小鼠動物模型，予化濁解毒軟堅方中藥進(jìn)行干預(yù)，5Fu為對照，通過對比觀察小鼠的一般情況、腫瘤生長情況、相關(guān)免疫指標(biāo)及血清VEGF含量、腫瘤組織中VEGF和MVD等指標(biāo)，來觀察化濁解毒軟堅中藥方對H22肝癌荷瘤小鼠組織生長及轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法:H22腫瘤細(xì)胞株接種小鼠腹腔，6天后無菌抽取腹水，稀釋成要求濃度的細(xì)胞懸液。將50只昆明小鼠隨機(jī)分為5組:模型組(M)、化濁解毒軟堅顆粒組(Z)、化濁解

2、毒軟堅方中藥組聯(lián)合5Fu組(Z+X)、5Fu組(X)，并設(shè)空白對照組（N)，每組10只。于每只小鼠左腋下接種H22腫瘤細(xì)胞4×106個，24小時后給以相應(yīng)的藥物干預(yù)，連續(xù)7天。稱量各組小鼠體重后，摘除眼球法小鼠，留取血液標(biāo)本，待ElASA法檢測血清VEGF含量;斷頸法處死小鼠，鈍性剝離腫瘤組織、脾臟、胸腺，分別稱重，計算抑瘤率、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)，以4％中性甲醛固定腫瘤組織待免疫組化法檢測VEGF及MVD表達(dá)水平。
　　結(jié)果:

3、>　　1、各組小鼠一般情況的比較
　　對比空白組小鼠，荷瘤各組小鼠均出現(xiàn)精神萎靡、活動減少、毛色欠光澤、食量減少、左腋皮下腫物突出等表現(xiàn)，其中M組小鼠表現(xiàn)最為突出。治療組之間相比，Z+X組精神狀態(tài)、活躍程度、食量等表現(xiàn)好于其余兩治療組，Z組精神狀態(tài)及活動度較X組相比表現(xiàn)較好。
　　2、荷瘤組小鼠腫瘤組織外觀形態(tài)的比較
　　M組腫瘤形狀不規(guī)則，顏色灰紅，質(zhì)地軟爛，無明顯包膜，腫瘤組織侵犯胸廓，甚至肺組織;Z組肉紅色，顏色

4、不均勻，部分呈暗紅色，質(zhì)韌，1個標(biāo)本包膜完整;Z+X組腫瘤較小，呈肉粉色，質(zhì)軟，可見4個完整包膜標(biāo)本。X組腫瘤肉紅色，部分為鮮紅色，質(zhì)韌，有2個標(biāo)本包膜完整。
　　3、荷瘤組小鼠腫瘤生長情況的比較
　　三個治療相比，Z+X組抑瘤率最高，其次是X組、Z組。平均腫瘤重量比較，Z+X組瘤重最小，其次是X組、Z組、M組，三個治療組平均瘤重均小于M組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);Z+X組下降明顯，與X組之間有顯著差異(P＜0.0

5、5);X組而與Z中藥組比較，二者無差異（P＞0.05）。
　　4、各組小鼠脾指數(shù)的比較
　　與空白對照組相比，荷瘤各組小鼠脾指數(shù)均增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);治療各組均低于M組，差異明顯(P＜0.05);Z組、Z+X組的脾指數(shù)均低于X組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);而Z組、Z+X組之間無明顯差異(P＞0.05)。
　　5、各組小鼠胸腺指數(shù)的比較
　　與空白組相比，荷瘤各組小鼠胸腺重量均下降，差異

6、有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);荷瘤組之間相比，M組、Z組、Z+X組的胸腺指數(shù)均高于X組，差別有有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);而Z組、Z+X組之間胸腺指數(shù)無明顯差異(P＞0.05)。
　　6、各組小鼠血清VEGF含量的比較
　　與空白組比較，荷瘤各組小鼠血清VEGF含量顯著增高，差異明顯(P＜0.05);荷瘤各組之間相比，治療組小鼠血清VEGF含量低于M組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);治療組中，Z組、X組中VEGF含量均

7、高于Z+X組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，Z+X組下降明顯，與X組之間差異顯著(P＜0.05);X組與Z組之間差異不顯著(P＞0.05)。
　　7、荷瘤組小鼠腫瘤組織VEGF的比較
　　與模型組相比，治療各組的VEGF積分光密度(IOD)及陽性面積均減低，差異明顯(P＜0.05);治療組之間比較，Z+X組IOD及陽性面積，均低于Z組、X組，有顯著差異(P＜0.05);X組IOD高于Z組(P＜0.05)，而陽性面積，兩者

8、差異不顯著(P＞0.05)。
　　8、荷瘤組小鼠腫瘤組織MVD值的比較
　　荷瘤各組間有腫瘤組織MVD值有顯著差異（P＜0.05）;與M組比較，其中Z+X組下降明顯，治療各組均低與M組，顯著差異(P＜0.05);Z+X組低于Z組、X組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);X組低于Z組，兩組之間有顯著差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、化濁解毒軟堅方可以改善H22荷瘤小鼠一般情況、減輕了腫瘤重量、提高了抑瘤率