細菌內(nèi)毒素誘導WHBE兔發(fā)熱模型的建立及其易感性評價.pdf

1、目的:白毛黑眼兔(White hair black eyes rabbit，WHBE)是浙江中醫(yī)藥大學動物實驗研究中心于1998年9月在日本大耳白兔(Japanese big-ear white rabbit，JW)生產(chǎn)群中發(fā)現(xiàn)，并通過定向培育繁殖，逐漸形成的一個遺傳穩(wěn)定、形態(tài)特征鮮明、生產(chǎn)性能穩(wěn)定的新品系，已在生物醫(yī)學研究中具有特殊的應用價值。由于兔的體溫變化十分靈敏，最易產(chǎn)生發(fā)熱反應，且發(fā)熱反應典型、恒定，故實驗兔不僅是各種藥品、醫(yī)

2、療器械和生物材料致熱原檢查中常用的實驗動物，也是各種感染性發(fā)熱模型首選的實驗動物。因此，建立和研究WHBE兔的發(fā)熱模型及其對發(fā)熱反應易感性，對拓寬WHBE兔在生物醫(yī)學中的應用價值具有重要意義。
　　方法:取健康普通級WHBE兔98只和JW兔98只，雌雄各半，分別靜脈注射不同劑量(1.25、2.5、5、10 EU/kg)細菌內(nèi)毒素誘發(fā)WHBE兔和JW兔發(fā)熱反應，并設空白對照組，記錄升溫曲線圖，計算發(fā)熱峰值、180min時體溫差、發(fā)熱

3、指數(shù)以及升溫率，并通過曲線擬合計算出體溫升高0.6℃時的發(fā)熱閾值，探討不同劑量的細菌內(nèi)毒素對WHBE兔致熱反應的敏感性。在此基礎上，另取雄性WHBE兔和JW兔各24只，采用靜脈注射10EU/kg細菌內(nèi)毒素誘發(fā)WHBE兔和JW兔發(fā)熱模型，并用20mg/kg布洛芬干預，記錄升溫曲線圖，計算發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)、藥物干預降溫率以及升溫率;同時造模4h后取血，進行血液學分析和NO含量的測定，同時取肝、肺、腎和心臟組織進行病理組織學HE染色觀察，探

4、討WHBE兔對藥物反應的敏感性。
　　結果:(1)隨細菌內(nèi)毒素注射劑量的增加致WHBE兔和JW兔的發(fā)熱反應增強，性別因素對細菌內(nèi)毒素所致WHBE兔和JW兔發(fā)熱反應無明顯影響(P＞0.05)。5 EU/kg和10 EU/kg的細菌內(nèi)毒素所致WHBE兔的致熱反應均高于JW兔，且WHBE兔的升溫率分別為60.7％和92.9％，JW兔的升溫率分別為39.3％和82.1％。另外，WHBE兔和JW兔的發(fā)熱閾值分別為5.72 EU/kg和7.9

5、3 EU/kg。(2)10 EU/kg的細菌內(nèi)毒素可引起WHBE兔和JW兔明顯的發(fā)熱反應，其發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)和升溫率均明顯升高，并可引起白細胞數(shù)目、中性粒細胞比例、單核細胞細胞比例、血小板數(shù)目和NO含量的顯著升高，而20mg/kg布洛芬干預后能明顯降低體溫和上述參數(shù)。與JW兔比，WHBE兔對細菌內(nèi)毒素所致升溫反應更明顯，其發(fā)熱峰值、發(fā)熱指數(shù)、升溫率、中性粒細胞比例和血小板數(shù)目、NO水平均高于JW兔，且布洛芬干預后WHBE兔組的降溫效果

6、和降溫率均高于JW兔組。病理組織學顯示，模型兔肝細胞水腫，部分胞漿呈空網(wǎng)狀，大量的炎性細胞浸潤，肺泡腔內(nèi)大量水腫液及漏出的紅細胞，肺泡內(nèi)中性粒細胞滯留聚集，肺泡擴張或萎陷，肺泡間隔明顯增厚，腎小球毛細血管擴張充血，并有局部出血，心肌間質輕度充血;而給予布洛芬后改善上述病理形態(tài)學改變。
　　結論:細菌內(nèi)毒素對WHBE兔具有較好的致熱敏感性，適于致熱原物質的檢查。采用細菌內(nèi)毒素能成功建立WHBE兔發(fā)熱模型，且該模型穩(wěn)定易行、重復性高，