組織蛋白酶S基因敲除在小鼠CABG后靜脈橋再狹窄作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)是治療冠心病的一種有效方法，但CABG后靜脈橋再狹窄發(fā)生率高，再狹窄中炎癥反應(yīng)和血管內(nèi)膜增生為關(guān)鍵過程。有研究稱，組織蛋白酶S（Cathepsin S，CatS）在血管再狹窄中起著重要的作用，表達(dá)上調(diào)。CatS基因敲除以后能否抑制CABG后靜脈橋再狹窄，還需進(jìn)一步深入研究。本研究即驗(yàn)證CatS基因敲除后對靜脈橋再狹窄有抑制作用，且這種抑制作用是通過MMP-9含量減少作用的途徑，減輕靜脈橋血管的再狹窄。

2、
　　方法：本次研究以CatS基因敲除后的小鼠為研究對象，作為實(shí)驗(yàn)組，以C57BL/6小鼠為對照組，利用Cuff套管技術(shù)建立小鼠下腔靜脈-頸動(dòng)脈移植模型，通過基因敲除鑒定，顯微鏡觀察血管內(nèi)膜增生來證實(shí)CatS基因敲除后對靜脈橋的再狹窄有抑制作用，同時(shí)通過酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）測定MMP-9酶的含量來進(jìn)一步探討CatS基因敲除后對CABG靜脈橋再狹窄抑制作用

3、的機(jī)制，以此為CABG術(shù)后靜脈橋再狹窄的防治提供新的理論依據(jù)。
　　結(jié)果：在靜脈移植術(shù)后不同的時(shí)間點(diǎn)（8h、1d、3d、7d、14d、28d），通過對移植靜脈取材并處理之后鏡下觀察發(fā)現(xiàn)：術(shù)后早期，內(nèi)膜增生在兩組之間無顯著差別，隨著術(shù)后時(shí)間的推移，對照組小鼠內(nèi)膜逐步增生，且變化較為明顯，而CatS基因敲除組內(nèi)膜雖也有增生，但其增生程度較對照組明顯減輕；靜脈移植術(shù)后，隨著時(shí)間的延長，CatS（-/-）組MMP-9含量表達(dá)較C57BL/

4、6組明顯減少，尤其是在術(shù)后2周，實(shí)驗(yàn)組（CatS（-/-）組）和對照組（C57BL/6組）MMP-9含量表達(dá)分別為（6.12±0.11）ng/ml和（9.23±0.12）ng/ml，兩組比較P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：本課題在順利完成Cuff套管技術(shù)建立小鼠下腔靜脈-頸動(dòng)脈移植模型基礎(chǔ)上，通過顯微鏡觀察血管內(nèi)膜增生證實(shí)了CatS基因敲除后在一定程度上能對靜脈橋再狹窄有抑制作用；并且通過MMP-9含量減少作用的途徑，