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文檔簡介
1、目的:探討海馬(Hi)-穹窿周區(qū)(PeF)orexin-A神經(jīng)和功能通路構成,以及orexin-A對大鼠海馬胃牽張(GD)敏感神經(jīng)元放電活動和胃運動的調(diào)控。
方法:選取健康成年雄性Wistar大鼠266只(體質(zhì)量250-300 g),采用熒光金逆行追蹤結合熒光金免疫組化方法,觀察Hi-PeF orexin-A神經(jīng)通路構成;通過記錄單細胞外神經(jīng)元放電活動,鑒定海馬GD敏感性神經(jīng)元;海馬微量注射orexin-A或orexin-A受
2、體拮抗劑SB334867,觀察海馬GD敏感性神經(jīng)元放電活動變化;電刺激PeF,觀察Hi內(nèi)orexin-A應答的GD敏感神經(jīng)元放電活動變化;并觀察電刺激PeF或Hi微量注射不同濃度的orexin-A,對大鼠胃運動的影響。
結果:在PeF可見有orexin-A和熒光金雙重標記的神經(jīng)元,提示,PeF內(nèi)部分orexin-A免疫陽性神經(jīng)元可發(fā)出神經(jīng)纖維投射至Hi。胃運動研究結果顯示,Hi微量注射orexin-A,大鼠胃運動幅度和頻率顯著
3、增加,并呈劑量依賴關系(p<0.05–0.01)。Hi微量注射SB-334867,可完全阻斷orexin-A促胃運動效應。電刺激PeF,大鼠胃運動幅度和頻率顯著增加(p<0.01)。而在Hi預先注射SB-334867,電刺激PeF引起的胃運動增強效應減弱(p<0.01)。90只大鼠胃擴張刺激后,在Hi共記錄到119個GD敏感性神經(jīng)元。Hi微量注射orexin-A,在63個胃牽張敏感興奮性神經(jīng)元(GD-E)中,有42個GD-E神經(jīng)元(42
4、/63,66.7%)興奮(P<0.01);有13個GD-E神經(jīng)元(13/63,20.6%)放電被抑制(P<0.01)。在56個胃牽張敏感抑制性神經(jīng)元(GD-I)中,Hi微量注射orexin-A,其中有35個GD-I(35/56,62.5%)神經(jīng)元放電頻率增加(P<0.01);14個GD-I神經(jīng)元(14/56,25%)放電呈現(xiàn)抑制效應(P<0.01)。預先Hi注射orexin-A受體拮抗劑SB334867,可完全阻斷orexin-A對GD
5、敏感神經(jīng)元的興奮或抑制效應。電刺激PeF后,75只大鼠Hi中鑒別出的57個orexin-A興奮性GD-E神經(jīng)元中,有43個(43/57,75.43%)興奮性進一步加強(P<0.01),8個神經(jīng)元(8/57,14%)放電活動減弱(P<0.01);海馬CA1區(qū)41個orexin-A興奮性GD-I神經(jīng)元中,有28個神經(jīng)元(28/41,68.29%)也因電刺激PeF而出現(xiàn)興奮效應(P<0.01),7個神經(jīng)元(7/41,17.07%)放電活動減弱
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