溫度應(yīng)激和順鉑(Cisplatin)對(duì)雄鼠睪丸損傷的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、冷熱應(yīng)激和化療藥物已成為造成男性不育的主要因素。本論文利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)探索冷熱應(yīng)激和化療藥物順鉑對(duì)雄鼠睪丸的影響。1.以成年雄性大鼠為實(shí)驗(yàn)材料，優(yōu)化和構(gòu)建了大鼠睪丸組織損傷的冷應(yīng)激和熱應(yīng)激模型，利用蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)冷、熱應(yīng)激響應(yīng)蛋白。2.以成年雄性小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，使用臨床化療藥物順鉑對(duì)小鼠睪丸造成藥物損傷，每只2.5mg/kg/d的順鉑用藥量，連續(xù)腹腔注射5天，分別在注射后1天、17天、34天、68天取樣觀察，選取損傷最

2、嚴(yán)重的小鼠睪丸利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，揭示順鉑造成小鼠睪丸損傷的響應(yīng)蛋白?；谏镄畔W(xué)揭示順鉑損傷響應(yīng)蛋白參與的代謝通路，優(yōu)選出可能緩解順鉑損傷的靶蛋白。
　　熱應(yīng)激研究中采用43℃熱水浴浸泡大鼠陰囊1小時(shí)構(gòu)建睪丸熱應(yīng)激模型，立即取樣后發(fā)現(xiàn)雖大鼠睪丸組織形態(tài)未發(fā)生改變，但細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)顯示已造成大鼠睪丸生精細(xì)胞發(fā)生凋亡，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比產(chǎn)生的差異表達(dá)的蛋白有18個(gè)，其中上調(diào)蛋白7個(gè)，下調(diào)11個(gè)。這些蛋白功能涉及刺激應(yīng)答、蛋白水解、總

3、代謝、氧化還原、信號(hào)傳導(dǎo)、凋亡等，包括Prdx6、Hspa5、Sod1、Uchl1等多種熱應(yīng)激大鼠睪丸響應(yīng)蛋白。
　　冷應(yīng)激研究中采用0℃冷水浴浸泡大鼠陰囊1小時(shí)構(gòu)建睪丸冷應(yīng)激模型，取樣后發(fā)現(xiàn)雖大鼠睪丸組織形態(tài)未發(fā)生改變，但細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)顯示已造成大鼠睪丸生精細(xì)胞發(fā)生凋亡，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比產(chǎn)生的差異表達(dá)蛋白有23個(gè)，其中上調(diào)蛋白11個(gè)，下調(diào)12個(gè)。這些蛋白功能涉及刺激應(yīng)答、蛋白水解、總代謝、氧化還原、信號(hào)傳導(dǎo)、凋亡等，包括Hnrn

4、pk、Hspd1、Hnrnpa2b1、Uchl1等多種冷應(yīng)激大鼠睪丸響應(yīng)蛋白。
　　化療藥物毒性損傷研究中采用小鼠腹腔注射順鉑2.5mg/kg/d連續(xù)5天構(gòu)建小鼠睪丸組織順鉑損傷模型，注射后第17天后小鼠睪丸組織損傷最嚴(yán)重，用該組小鼠睪丸蛋白與對(duì)照組相比產(chǎn)生的差異表達(dá)的蛋白有31個(gè)，其中上調(diào)蛋白23個(gè)，下調(diào)8個(gè)。這些蛋白功能涉及刺激應(yīng)答、蛋白水解、氧化還原、轉(zhuǎn)運(yùn)、凋亡、抗氧化等，包括Gstm1、Pgam1、Prdx6、Nme1和N