氨氯地平和纈沙坦對(duì)人冠脈內(nèi)皮細(xì)胞NADPH氧化酶亞基gp91phox和p22phox表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究不同濃度的氨氯地平和纈沙坦對(duì)人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞（HCAEC）內(nèi)尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸( NADPH)氧化酶亞基gp91phox和p22phox的影響。
　　方法：取體外培養(yǎng)的3~10代之內(nèi)的人冠脈內(nèi)皮細(xì)胞，以1×105個(gè)/ml的密度接種到12個(gè)直徑為100 mm細(xì)胞培養(yǎng)皿，予DMEM完全培養(yǎng)液(90％DMEM+10%FBS+青霉素100 U/ml+鏈霉素100 U/ml)培養(yǎng)。待細(xì)胞鋪滿整個(gè)培養(yǎng)皿底面積的80%，隨機(jī)

2、將細(xì)胞分為兩組：氨氯地平組，根據(jù)所含藥物濃度分為對(duì)照組、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L6組；纈沙坦組，根據(jù)所含藥物濃度分為對(duì)照組、1×10-4mol/L、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L6組。分別在不同培養(yǎng)皿中加入含相應(yīng)藥物濃度1%FBS的完全培養(yǎng)液，對(duì)照組加入與實(shí)驗(yàn)組相同體積不含藥物的1

3、%FBS完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后，收取細(xì)胞。根據(jù)膜蛋白提取試劑盒使用說(shuō)明提取膜蛋白，用 Bradford法測(cè)定膜蛋白濃度，用Western blot法測(cè)定不同藥物濃度細(xì)胞膜中p22phox和gp91phox水平。Western blot結(jié)果目的條帶應(yīng)用軟件Photoshop進(jìn)行灰度分析計(jì)算。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多組間樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較用SNK-q檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

4、義。
　　結(jié)果：不同濃度氨氯地平對(duì)HCAEC內(nèi)NADPH氧化酶亞基p22phox表達(dá)均有促進(jìn)作用（P<0.05），高濃度氨氯地平對(duì)gp91phox有抑制作用（P<0.05），低濃度則會(huì)促進(jìn)gp91phox的表達(dá)（P<0.05）。不同濃度纈沙坦對(duì)p22phox與gp91phox的表達(dá)均有顯著的抑制作用（P<0.05），且有隨著藥物濃度增高抑制作用增強(qiáng)的趨勢(shì)（P<0.05）。
　　結(jié)論：纈沙坦有抑制氧化應(yīng)激的效力，并隨濃度增高而