纈沙坦對(duì)人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮素含量的影響.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)成人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞；研究纈沙坦(valsartan)和/或血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對(duì)體外培養(yǎng)的成人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮素(endothelin)含量的影響。 方法：對(duì)急死病人的前降支采用膠原酶消化法結(jié)合機(jī)械法獲得內(nèi)皮細(xì)胞，用含胎牛血清(FBS)的Dulbecco的改良的Eagle培養(yǎng)液(DMEM)培養(yǎng)細(xì)胞并傳代，將第二代傳代細(xì)胞凍存?zhèn)溆?。?fù)蘇上述凍存的細(xì)胞，并將其接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，待第三代傳代細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)培養(yǎng)

2、板表面60％時(shí)加入藥物，藥物分為對(duì)照組、纈沙坦組(濃度為10μmol/l)組、AngⅡ(濃度為10μmol/l)組和AngⅡ(濃度為10μmol/l)加3種不同濃度(0.1、1.0、10μmol/l)纈沙坦組，先加入纈沙坦預(yù)作用半小時(shí)，再加入AngⅡ，培養(yǎng)36小時(shí)后檢測(cè)內(nèi)皮素的含量。 結(jié)果：細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果：原代培養(yǎng)的細(xì)胞24小時(shí)貼壁率為30～40％，培養(yǎng)兩天后鏡下見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，培養(yǎng)5天細(xì)胞數(shù)量明顯增加，可達(dá)培養(yǎng)表面的40％左右，

3、突起縮短，胞體連接緊密，培養(yǎng)7天，鏡下可見(jiàn)細(xì)胞呈大片克隆狀，細(xì)胞間界限不清。10天后血管內(nèi)皮細(xì)胞基本呈單層狀，緊密排列。傳代細(xì)胞多為多角形，邊界清楚，生長(zhǎng)活躍，符合血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)特性。藥物試驗(yàn)結(jié)果：AngⅡ組的內(nèi)皮素含量明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0000)；在纈沙坦組和對(duì)照組之間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；AngⅡ組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+0.1I.tmol/1纈沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0000

4、)； AngII組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+1μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0000)；AngII組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+10μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0000)；AngII+0.1μmol/l纈沙坦組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+1.0μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0000)；AngⅡ+1μmol/l纈沙坦組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+10μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(