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文檔簡介
1、目的:研究抗Fas錘頭狀核酶對COPD模型小鼠T淋巴細胞Fas的表達及其凋亡的影響,觀察T淋巴細胞亞群的變化。
方法:雄性6周齡清潔級小鼠60只,適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后,隨機分為COPD組(50只)、健康對照組(10只)。采用煙霧暴露法進行COPD小鼠造模,通過小鼠肺功能檢查及肺組織病理HE染色對COPD小鼠模型進行評估。造模成功后將COPD小鼠隨機分為:A組(COPD組)、B組(空轉(zhuǎn)染組)、C組(抗Fas核酶轉(zhuǎn)染組)、D組(突變核
2、酶轉(zhuǎn)染組),對 B、C、D小鼠脾臟 T淋巴細胞分別進行慢病毒包裝的空轉(zhuǎn)染、FAS核酶轉(zhuǎn)染、突變核酶轉(zhuǎn)染;通過RT-PCR、Western blot對4組T淋巴細胞進行Fas mRNA及Fas蛋白表達的檢測,用流式細胞術(shù)檢測CD4+T淋巴細胞凋亡水平及CD4+/CD8+比值。
結(jié)果:(1)通過肺功能檢查及肺組織病理 HE染色進行模型評估,結(jié)果顯示,與健康對照組相比,COPD小鼠動態(tài)肺順應(yīng)性及呼氣峰流速降低,氣道阻力升高,有統(tǒng)計學
3、意義,P<0.01,并且肺組織病理切片可見肺氣腫的形成和慢性炎癥細胞浸潤,證明COPD小鼠模型是構(gòu)建成功的。(2)與A組比較,B組Fas mRNA及Fas蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義,P>0.05。C組和D組Fas mRNA及Fas蛋白表達水平降低,有統(tǒng)計學意義,P<0.05。并且C組與D組相比,C組Fas mRNA及Fas蛋白表達更低,差異有統(tǒng)計學意義,P<0.05。(3)與A組比較,B組CD4+T淋巴細胞凋亡率及CD4+/CD8+比
4、值的差異無統(tǒng)計學意義,P>0.05。C組和D組CD4+T淋巴細胞凋亡率降低、CD4+/CD8+比值升高,有統(tǒng)計學意義,P<0.05。并且C組與D組相比, C組CD4+T淋巴細胞凋亡率更低、CD4+/CD8+比值更高,有統(tǒng)計學意義,P<0.05。
結(jié)論:COPD小鼠T淋巴細胞經(jīng)過抗Fas核酶干預(yù),可以有效抑制COPD小鼠T淋巴細胞的Fas mRNA及Fas蛋白的表達,降低COPD小鼠CD4+T淋巴細胞凋亡率,使CD4+/CD8+
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