激光微孔脫細胞豬真皮支架對Ⅲ度皮膚燒傷血管化的影響.pdf

1、目的：探討激光微孔聯(lián)合反復(fù)凍融脫細胞方法制備的激光微孔脫細胞豬真皮支架對大鼠Ⅲ度皮膚燒傷創(chuàng)面愈合作用及血管化的影響，為臨床提供理想的真皮支架材料。
　　方法：
　　第一步采用激光打微孔+低濃度胰蛋白酶+反復(fù)凍融+恒溫振蕩制備的異種脫細胞豬真皮基質(zhì)，HE染色檢測；
　　第二步將制備的激光微孔異種脫細胞豬真皮和普通打孔異種脫細胞豬真皮進行皮下埋植實驗。具體方法：24只300g左右成年雄性無病原體級SD大鼠，將兩種真皮基質(zhì)分

2、別埋植于SD大鼠背部左右兩側(cè)皮下，術(shù)后3天、1周、2周和3周掀開皮瓣進行真皮基質(zhì)HE染色和CD31免疫組化染色標記。
　　第三步復(fù)合皮移植實驗。具體方法：72只300g左右成年雄性無病原體級SD大鼠，依據(jù)真皮移植物的不同，分為激光微孔脫細胞豬真皮(A組)、普通打孔脫細胞豬真皮（B組）兩種真皮支架分別移植至Ⅲ度燒傷清創(chuàng)后創(chuàng)面，另一組創(chuàng)面清創(chuàng)后僅覆蓋油紗（C組），術(shù)后1周在異種豬真皮( A和B組)或者肉芽上（C組）植入表皮，大體觀察植

3、入真皮支架1、2、3周創(chuàng)面的修復(fù)情況，并通過HE染色和免疫組化標記創(chuàng)面中CD31、α-SMA表達陽性血管并計數(shù)。
　　結(jié)果：制備的脫細胞豬真皮呈瓷白色，有光澤，柔軟；顯微鏡下未見細胞殘留，真皮膠原結(jié)構(gòu)完整。皮下埋植實驗3周結(jié)果顯示：真皮基質(zhì)與大鼠受皮組織相容性好，無排斥反應(yīng)；CD31標記的陽性血管數(shù)：術(shù)后3天兩組無明顯差異，埋植術(shù)后1周、2周和3周，微孔組表達陽性血管數(shù)均明顯多于普通孔組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。復(fù)合皮移植實驗結(jié)果：兩

4、組脫細胞真皮支架及無支架對照組植入后1～3周創(chuàng)面中CD31、α-SMA表達陽性血管數(shù)均持續(xù)增加，其中A組顯著高于B、C組，B組顯著高于C組；真皮支架植入一周后在真皮上植入表皮，表皮移植后一周A組表皮融合成片，B組表皮散在存活皮片生長情況好；術(shù)后3周A組表皮皮片融合成片，支架已與創(chuàng)面完全結(jié)合；B組表皮開始融合，皮片生長良好，支架與基底結(jié)合緊密。
　　結(jié)論：
　　1.本實驗研究的脫細胞方法脫細胞徹底，基本上達到了祛除所有含抗原成