大黃素對人正常肝細胞LO2株FXR-BSEP通路干預(yù)機制研究.pdf

1、目的：觀察大黃素（Emodin）對人正常肝細胞LO2株中FXR及下游信號因子BSEP基因、蛋白表達的影響。
　　方法：培養(yǎng)LO2細胞，將大黃素按低、中、高（0.02、0.04、0.08μg/ml）三個劑量對LO2細胞進行干預(yù)，以熊去氧膽酸（0.1μg/ml）、地塞米松（0.785ng/μl）為陽性對照，通過RT-PCR和Western-blot法檢測各個處理組FXR和BSEP基因的相對表達量和蛋白表達量的變化；使用FXR抑制劑Gu

2、ggulsterones預(yù)先處理LO2細胞，下調(diào)FXR表達后，再給予大黃素低、中、高劑量進行干預(yù)，以熊去氧膽酸、地塞米松為對照，通過RT-PCR和Western-blot法檢測各個處理組FXR和BSEP基因的相對表達量和蛋白表達量的變化；使用FXR激動劑GW4064預(yù)先處理LO2細胞，上調(diào)FXR表達后，再給予大黃素低、中、高劑量進行干預(yù)，以熊去氧膽酸、地塞米松為對照，通過RT-PCR和Western-blot法檢測各個處理組FXR和BS

3、EP基因的相對表達量和蛋白表達量的變化。
　　結(jié)果：
　　1.RT-PCR結(jié)果：和空白對照組相比，大黃素可以促進FXR及BSEP的mRNA表達；
　　2. Western-blot結(jié)果：在FXR正常表達的情況下，大黃素低、中、高三個濃度干預(yù)組的FXR蛋白表達量高于空白組（P<0.01）；在使用抑制劑Guggulsterones下調(diào)FXR表達的情況下，與單純給予抑制劑組相比，大黃素中、高劑量組可明顯促進FXR蛋白表達水平

4、（P<0.01），大黃素低、中、高劑量組可明顯促進BSEP蛋白表達水平（P<0.01）；在使用激動劑GW4064上調(diào)FXR表達時，與單純給予激動劑組相比，大黃素高劑量組可明顯促進FXR蛋白的表達（P<0.01）。
　　結(jié)論：大黃素在細胞水平上，可以對LO2細胞中FXR和BSEP的mRNA、蛋白表達起到一定程度的促進作用，具體二者之間是否還存在其他旁路信號因子的影響，大黃素在機體之中能否真正起到緩解和治療淤積膽汁的作用還有待于進一步