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1、目的:探討新生雄性大鼠短期暴露環(huán)境內(nèi)分泌干擾物鄰苯二甲酸二(2-乙己基)酯DEHP對(duì)其雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育和功能的影響。通過(guò)分析Nrf2和notch信號(hào)通路中關(guān)鍵信號(hào)分子Nrf2和notch1蛋白表達(dá)情況,以及相關(guān)氧化應(yīng)激損傷指標(biāo)檢測(cè),初步探討Nrf2以及notch信號(hào)通路在DEHP致未成熟睪丸發(fā)育損傷的作用。
方法:新生雄性大鼠42只分為:對(duì)照組(玉米油)、DEHP250mg/kg暴露組、DEHP500mg/kg暴露組。在生后第
2、1到第15天,分別每日經(jīng)口灌胃玉米油和DEHP。PND36時(shí),每組隨機(jī)取6只,經(jīng)10%水合氯醛麻醉下取材。PND90時(shí),行交配實(shí)驗(yàn)后,全部麻醉下取材,附睪組織做精子計(jì)數(shù)和精子畸形率的檢測(cè)。在PND1,PND10,PND20,PND36以及PND90時(shí),測(cè)量各組雄鼠的AGD。PND36取得的睪丸組織行HE染色、氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)以及關(guān)鍵蛋白notch1、Nrf2的表達(dá)。
結(jié)果:與對(duì)照組相比,DEHP250mg/kg暴露組的AG
3、D長(zhǎng)度偏低,而睪丸、附睪臟器系數(shù)、精子計(jì)數(shù)、精子畸形率以及以及交配實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)明顯差異,睪丸組織可見(jiàn)生精上皮排列稍紊亂。DEHP500mg/kg組的AGD長(zhǎng)度、睪丸臟器系數(shù)較正常對(duì)照組偏低;附睪臟器系數(shù)、合籠實(shí)驗(yàn)結(jié)果與正常對(duì)照組比無(wú)顯著性差異,但精子畸形率較正常組顯著性增高,并且組織學(xué)上可見(jiàn)睪丸組織形態(tài)有所改變。DEHP500mg/kg組,睪丸組織內(nèi)ROS水平、SOD酶活性以及MDA較對(duì)照組明顯增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Nrf2蛋白以及
4、notch1蛋白表達(dá)量降低;DEHP250mg/kg暴露組,其睪丸組織內(nèi)ROS水平、SOD酶活性及MDA較對(duì)照組升高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Nrf2以及notch1蛋白的表達(dá)較對(duì)照組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:新生雄性大鼠短期DEHP500mg/kg暴露可導(dǎo)致其成年后精子質(zhì)量的下降,突出表現(xiàn)在精子畸形率上;而DEHP250mg/kg短期暴露對(duì)其成年后生殖功能影響不明顯,但組織學(xué)上仍有輕微改變。DEHP的暴露可以引起睪丸組織氧化壓
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