母鼠維生素D缺乏對子代鼠肺發(fā)育及CyclinD1表達(dá)影響的研究.pdf

1、研究目的：
　　1.觀察孕期及哺乳期雌性大鼠維生素D缺乏對子代鼠體重、肺濕重及顯微鏡下肺組織發(fā)育的影響。
　　2.觀察大鼠在孕期、哺乳期維生素D缺乏對子代鼠肺組織細(xì)胞周期素D1（CylinD1）的表達(dá)的影響。
　　3.探討維生素D缺乏對子代鼠肺發(fā)育影響的可能機制。
　　研究方法：
　　未孕未育成年雌性SD大鼠12只，完全隨機分配為維生素D缺乏模型組（VDD組）及正常對照組（對照組），每組共6只，兩組均予普通

2、飼料試喂養(yǎng)2周，缺D組予完全避光、不含維生素D飼料喂養(yǎng)，正常組予正常光照、普通飼料喂養(yǎng)，2周后，與成年雄性SD大鼠（6只）以2:1比例合籠交配，以觀察到雌鼠陰栓當(dāng)天記為受孕第1天，建立孕鼠VitD缺乏模型。利用競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗技術(shù)（ELISA）分別檢測母鼠產(chǎn)前喂養(yǎng)2周及產(chǎn)后21天血清25二羥維生素D3（25-(OH)-D3）的水平。分別用電子分析天平稱出生后第1、7、14、21天子代鼠體重，并取肺組織，用分析天平稱取肺濕重，蘇木精

3、-伊紅染色（HE染色）后光鏡下分別觀察肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，免疫組化法分別檢測肺組織中CyclinD1蛋白的表達(dá)。
　　研究結(jié)果：
　　1.母鼠血清25-(OH)-D3的水平分析：兩組母鼠試喂養(yǎng)2周后，VDD組與對照組血清25-(OH)-D3水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；母鼠產(chǎn)后21天， VDD組血清25-(OH)-D3水平低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；VDD組產(chǎn)后21天血清25-(OH)-D3的水平明顯

4、低于試喂2周，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；對照組試喂2周及產(chǎn)后21天血清25-(OH)-D3的水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2.子代鼠體重分析：VDD組與對照組小鼠體重逐漸增長，各日齡兩組體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.子代鼠肺濕重分析：VDD組與對照組子代鼠肺濕重逐漸增長，生后第7、14、21天肺濕重VDD組低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），第1天兩組肺濕重差異無統(tǒng)計學(xué)意義

5、（P＞0.05）。
　　4.HE染色后光鏡下子代鼠肺組織結(jié)構(gòu)病理學(xué)改變：光鏡下同日齡VDD組子代鼠肺組織結(jié)構(gòu)較對照組肺泡間隔增寬，肺泡組織較少，肺泡小而不規(guī)則，終末細(xì)支氣管及小支氣管形態(tài)不規(guī)則，發(fā)育不良。
　　3. CyclinD1表達(dá)的分析：VDD組及對照組均在支氣管黏膜上皮細(xì)胞表達(dá)明顯，對照組CyclinD1在生后第1天表達(dá)最強，第7、14、21天逐漸減弱，而VDD組CyclinD1在生后第7天表達(dá)最強，高于對照組（P＜

6、0.05），第1天表達(dá)低于對照組（P＜0.05），第14、21天逐漸減弱，均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　研究結(jié)論：
　　1.母鼠孕期、哺乳期VitD缺乏對子代鼠體重、生后第1天肺濕重影響不明顯，降低了生后第7、14、21天仔鼠肺濕重。
　　2.母鼠孕期、哺乳期VitD缺乏延緩了子代鼠的肺發(fā)育過程。
　　3.母鼠孕期及哺乳期VitD缺乏推遲了子代鼠肺組織CyclinD1表達(dá)高峰，延緩了Cyc