NPM1在小鼠卵泡發(fā)育和黃體形成過(guò)程中的表達(dá)和功能研究.pdf

1、核磷蛋白（Nucleophosmin，NPM1）是一種多功能蛋白，可參與核糖體的生物合成，通過(guò)調(diào)節(jié)中心體的復(fù)制來(lái)維持基因組的穩(wěn)定性，可在核質(zhì)間穿梭，具有分子伴侶作用，并可通過(guò)多種信號(hào)通路調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡，參與多種腫瘤的發(fā)生。
　　 本實(shí)驗(yàn)利用原位雜交的方法檢測(cè)了NPM1在小鼠性成熟卵巢、PMSG誘導(dǎo)的卵泡發(fā)育過(guò)程、hCG誘導(dǎo)的排卵以及黃體形成中的表達(dá)。在小鼠性成熟過(guò)程中，即從出生開(kāi)始到出生后40天，NPM1mRNA在各個(gè)階段的

2、卵泡中均有表達(dá)。NPM1mRNA在原始卵泡和初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞中表達(dá)，隨著卵泡發(fā)育，在次級(jí)卵泡和有腔卵泡的顆粒細(xì)胞中的表達(dá)增強(qiáng)。在成熟卵泡中，NPM1mRNA在卵丘顆粒細(xì)胞中表達(dá)較強(qiáng)，壁顆粒細(xì)胞中表達(dá)減弱。在PMSG誘導(dǎo)的小鼠卵泡發(fā)育過(guò)程中，NPM1mRNA在顆粒細(xì)胞中的表達(dá)從PMSG處理后的第6小時(shí)開(kāi)始增強(qiáng)，在第12小時(shí)出現(xiàn)峰值，此時(shí)顆粒細(xì)胞處于增殖時(shí)期。在第36小時(shí)和48小時(shí)，顆粒細(xì)胞增殖下降，NPM1mRNA在顆粒細(xì)胞中的表達(dá)明顯

3、減弱。此外，小鼠注射PMSG48小時(shí)之后注射hCG，誘導(dǎo)成熟卵泡排卵。在hCG處理后4小時(shí)和8小時(shí)，NPM1mRNA分別在排卵前的GVBD和卵丘擴(kuò)展時(shí)的卵丘顆粒細(xì)胞中有較強(qiáng)的表達(dá)。在hCG處理后16小時(shí)和18小時(shí)的排卵后的卵泡中，NPM1mRNA在壁顆粒細(xì)胞中表達(dá)較弱。注射PMSG48小時(shí)后注射hCG，2至3天后，NPM1mRNA在黃體形成過(guò)程中的黃體中有較強(qiáng)的表達(dá)。
　　 我們于體外培養(yǎng)了小鼠原代顆粒細(xì)胞，用不同濃度的NPM1

4、的特異性抑制劑NSC348884（0μM，0.5μM，1μM，2μM）處理24h后，利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)了NPM1、P450scc、StAR基因的表達(dá)情況。結(jié)果顯示P450scc基因的表達(dá)量隨著NSC348884濃度的增加而下降，而StAR的表達(dá)沒(méi)有顯著的變化趨勢(shì)，推測(cè)NPM1可能通過(guò)作用于P450scc促進(jìn)類(lèi)固醇激素的合成。
　　 這些結(jié)果表明，NPM1可能在小鼠卵泡發(fā)育的顆粒細(xì)胞增殖和黃體形成過(guò)程中起重要作用，并且可能促