芍藥苷單用或聯(lián)合氟康唑對小鼠系統(tǒng)性白念珠菌感染的作用及機制研究.pdf

1、目的:評價芍藥苷單用或聯(lián)合氟康唑在小鼠系統(tǒng)性白念珠菌感染模型中的作用及其可能的作用機制。
　　方法:在本次實驗中，小鼠隨機分成5組（每組10只）:陽性對照組、芍藥苷組、氟康唑組、芍藥苷+氟康唑組及陰性對照組。除了陰性對照組，各組均給予尾靜脈注射白念珠菌標準菌株ATCC5314細胞懸液，構建小鼠系統(tǒng)性白念珠菌感染模型。在白念珠菌感染前5天，陽性對照組、氟康唑組及陰性對照組給予生理鹽水灌胃，其余組給予芍藥苷灌胃。感染后繼續(xù)給藥10天，

2、陽性對照組和陰性對照組給予生理鹽水灌胃，其余組給予相應的藥物（芍藥苷、氟康唑或兩者合用）灌胃。在自念珠菌系統(tǒng)感染后觀察30天，記錄各組小鼠的一般狀況、死亡時間及死亡數(shù)目。為了進一步分析可能的免疫機制，在感染后第10天，取小鼠眼球靜脈血，利用luminex法測細胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-22、IL-4、IL-17等細胞因子的水平;與此同時，利用流式細胞分析Th1(IFN-γ+CD4+T細胞)、Th17(IL-17+CD4+T細胞

3、)及Th2(IL-4+CD4+T細胞)細胞的比例。頸椎脫臼處死小鼠，留取各臟器組織，通過比較各臟器的組織病理學改變和臟器菌載量評估炎癥感染程度。另外在感染后第30天，每組隨機選取4只存活小鼠，頸椎脫臼處死，留取肝、腎、脾進行稱重、研磨、培養(yǎng)和菌落計數(shù)。
　　結果:
　　(1)計算小鼠30天的平均生存時間（單位天）:陽性對照組10.4±2.50，芍藥苷組8.2±1.75，氟康唑組29±3.16，芍藥苷+氟康唑組24.6±6.5

4、5，陰性對照組30。相對于陽性對照組，芍藥苷組縮短了小鼠的平均生存時間(p＜0.05);相對于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組的小鼠的平均生存時間同樣縮短，差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　(2)血清細胞因子結果顯示:陽性對照組血清細胞因子IFN-γ、IL-17及IL-22的水平高于芍藥苷組，而IL-4水平降低。相對于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組血清細胞因子IFN-γ、IL-17及IL-22的水平下降，而IL-4水平升高（p＜0.

5、05)。
　　(3)流式細胞分析表明:相對于陽性對照組，芍藥苷組Th1(IFN-γ+CD4+)、Th17(IL-17+CD4+)細胞比例下降，而Th2(IL-4+CD4+)細胞的比例上升（p＜0.05)。相對于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組Th1(IFN-γ+CD4+T細胞)、Th17(IL-17+CD4+T細胞)比例下降，而Th2(IL-4+CD4+T細胞)的比例上升(p＜0.05)。
　　(4)計算感染后第10天、30天，小

6、鼠腎臟菌落計數(shù)，實驗第10天各組腎臟菌落計數(shù)為:陽性對照組4.97±0.65，芍藥苷組5.10±0.37，氟康唑組3.21±0.11，芍藥苷+氟康唑組4.61±0.14，陰性對照組0，陽性對照組腎臟載菌量多于芍藥苷組(P＜0.05)，芍藥苷+氟康唑組腎臟載菌量大于氟康唑組，統(tǒng)計學上有明顯意義（P＜0.05）。實驗第30天氟康唑組腎臟載菌量為:3.49±0.52，芍藥苷+氟康唑組腎臟載菌量:5.03±0.55，兩組間差異具有統(tǒng)計學意義(p