載RANKL的磷酸鈣骨水泥-聚乳酸-羥基乙酸復(fù)合物在體內(nèi)降解成骨的研究.pdf

1、目的:探索添加RANKL對磷酸鈣骨水泥/聚乳酸-羥基乙酸微球復(fù)合物在體內(nèi)降解成骨的影響。
　　方法:采用雙乳化法制備PLGA微球，按0.2gPLGA微球/5μgRANKL的比例進(jìn)行混合后孵育30分鐘，然后冷凍干燥24小時(shí)，獲得表面吸附有RANKL的PLGA微球，再按質(zhì)量比為CPC∶PLGA=4∶1加入CPC中，混勻。選用18只成年健康的SD雄性大鼠(平均體重約310g)，制備后肢股骨髁突缺損模型，按照植入材料不同隨機(jī)分為3組。A:

2、實(shí)驗(yàn)組(CPC/PLGA+RANKL)、B:陰性對照組(CPC/PLGA)、C:空白組（不植入任何材料）;A組為將添加有RANKL的CPC/PLGA微球復(fù)合物(CPC/PLGA+RANKL)植入股骨髁突缺損中;B組為將CPC/PLGA微球復(fù)合物植入股骨髁突缺損中;C組為制備股骨髁突缺損后不植入任何材料;3組動物觀察4周、8周、12周后處死，切取股骨髁突標(biāo)本。對樣本進(jìn)行組織學(xué)觀察分析，分析CPC/PLGA+RANKL復(fù)合物在體內(nèi)的降解及骨

3、組織反應(yīng)。用Image pro plus6.0專業(yè)圖像分析軟件測量各組骨缺損區(qū)的新生骨組織面積比例，再用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:SD大鼠術(shù)后恢復(fù)良好，術(shù)區(qū)未見明顯紅腫、化膿等感染癥狀，進(jìn)食規(guī)律，活動正常，未觀察到毒性反應(yīng)及其它異常反應(yīng)。
　　組織學(xué)檢查:(1)術(shù)后4周時(shí)，CPC/PLGA+RANKL組可觀察到缺損邊緣處的CPC出現(xiàn)明顯的降解吸收，被新生骨組織替代，條索狀的新生骨組織相互交織成網(wǎng)狀，

4、并向缺損中心長入;CPC/PLGA組可觀察到缺損邊緣處有少量的CPC發(fā)生降解，新生骨組織生成的量較少，且僅位于邊緣處;空白組缺損范圍內(nèi)僅有少量條索狀或島狀的新生骨組織散在分布。(2)術(shù)后8周時(shí)，CPC/PLGA+RANKL組PLGA微球出現(xiàn)降解，CPC的降解較4周時(shí)更明顯，且材料內(nèi)部的CPC也出現(xiàn)了降解，被新生骨組織替代，使得原始的邊界難以辨認(rèn);CPC/PLGA組的PLGA微球也發(fā)生了降解，新生骨組織向缺損內(nèi)生長，新生骨組織的量比4周時(shí)

5、明顯增多;空白組新骨組織生成的量增多，呈條索狀或小片狀。(3)術(shù)后12周時(shí)，CPC/PLGA+RANKL組植入材料大部分已經(jīng)降解，材料內(nèi)部只有少量CPC殘留以及邊緣處散在的未被降解的CPC基質(zhì)，新生骨組織交織呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);與CPC/PLGA+RANKL組相似，CPC/PLGA組材料內(nèi)部只有少部分CPC殘留，邊緣處仍有散在的CPC未被降解，植入材料的結(jié)構(gòu)較為疏松，已經(jīng)失去原有的完整性;空白組新生骨組織較8周時(shí)增多，向缺損中心生長，缺損未能完

6、全愈合。
　　新生骨面積比例分析:(1)術(shù)后4周時(shí)，新生骨面積比例的比較為CPC/PLGA+RANKL組(9.66±3.84)％＞空白組(5.76±1.58)％＞CPC/PLGA組(4.01±3.51)％，CPC/PLGA+RANKL組和CPC/PLGA組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CPC/PLGA+RANKL組和空白組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，CPC/PLGA組和空白組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.

7、05）;(2)術(shù)后8周時(shí)，新生骨面積比例的比較為CPC/PLGA+RANKL組(25.01±7.32)％＞CPC/PLGA組(23.37±4.13)％＞空白組(6.11±5.37)％，CPC/PLGA+RANKL組和CPC/PLGA組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），CPC/PLGA+RANKL組與空白組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CPC/PLGA組與空白組之間的差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;(3)術(shù)后12周