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文檔簡介
1、研究背景
反復種植失?。╮epeated implant failure,RIF)的具體分子機制尚不十分明確,目前已知2/3的RIF是由子宮內(nèi)膜容受性失調(diào)引起的,究其原因可能與免疫相關,已有的免疫學研究表明,妊娠是一種同種異體排斥現(xiàn)象,正常妊娠的胚胎,為半同體組織抗原不被母體排斥影響而生存,蛻膜組織與正常免疫微環(huán)境有一定關聯(lián)。
子宮自然殺傷細胞(uterine natural killer cell,uNK)是子宮內(nèi)
2、膜特有的自然殺傷(NK)細胞,表面特異性標記是CD56,絕大部分uNK細胞表型為CD(56bright) CD16(-),細胞毒性低,分泌免疫調(diào)節(jié)細胞因子、血管生長因子等,在著床和蛻膜免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮積極功能作用。反復種植失敗患者分泌期CD56+細胞比率高于正常婦女,提示uNK細胞可能在反復種植失敗中對子宮內(nèi)膜容受性的調(diào)節(jié)起到一定作用。白細胞介素-15(interleukelin-15,IL-15)是屬于Th1相關性細胞因子,有研究顯示它
3、能促進NK細胞的分化和功能作用,正常婦女子宮內(nèi)膜分泌期 IL-15 mRNA表達上調(diào),在分泌晚期升高為胚胎著床做好準備。IL-15是否在反復種植失敗的患者分泌期內(nèi)膜的表達增加,需要作進一步研究。有研究提示當腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)表達過高時,打破了種植窗Th1/Th2因子的平衡,抑制子宮內(nèi)膜蛻膜化進程,促使上皮細胞凋亡,增加Th1型細胞因子的免疫殺傷反應,阻斷滋養(yǎng)細胞的侵入,產(chǎn)生前
4、列腺素和活化金屬蛋白酶(MMPs)如MMP-2和MMP-9,降解絨毛的細胞外基質(zhì),引發(fā)早期妊娠失敗。因此,uNK細胞與胚胎種植、胎兒生長發(fā)育和早期胎盤密切相關,這種關系一旦失去平衡,就會引起反復種植失敗或早期自然流產(chǎn)。
在各種打破免疫因素平衡的改變可能導致胚胎著床失敗,因此本研究檢測RIF子宮內(nèi)膜 CD56、IL-15、TNF-α的表達改變,探索其與RIF發(fā)生的相關性。
目的
1.分別檢測RIF與正常分泌期
5、子宮內(nèi)膜CD56、IL-15、TNF-α的表達情況。
2.探索CD56、IL-15、TNF-α在RIF患者子宮內(nèi)膜分泌期是否表達相關,為RIF患者的臨床治療提供理論依據(jù)。
材料與方法
本研究課題經(jīng)過鄭州大學第一附屬醫(yī)院的倫理委員會批準,研究中所有入組研究對象均已告知實驗內(nèi)容并已簽署知情同意書。選擇2016年9月至2017年3月于本院生殖中心行IVF-ET/ICSI-ET/Thaw-ET助孕的患者中有助孕妊娠
6、史擬再次助孕者為對照組,以至少移植4個優(yōu)質(zhì)胚胎或至少移植三個新鮮周期或冷凍周期后仍未能實現(xiàn)臨床妊娠的患者為實驗組。本實驗分為兩個部分,第一部分實驗包括10例對照組和12例實驗組,用qRT-PCR法檢測子宮內(nèi)膜CD56、IL-15、TNF-α的定量表達;第二部分實驗包括10例對照組和12例實驗組,用免疫組化法檢測子宮內(nèi)膜CD56、IL-15、TNF-α的定位表達。
結果
1. qRT-PCR法檢測結果顯示,CD56、I
7、L-15、TNF-α在分泌期正常子宮內(nèi)膜與反復種植失敗患者內(nèi)膜均有表達,但在RIF組表達均顯著高于對照組,差異有顯著統(tǒng)計學差異(CD56:4.533±2.616vs.1.302±1.163,P=0.002;IL-15:4.064±2.247vs.1.614±1.713,P=0.01; TNF-α:6.313±1.912vs.1.479±0.986, P=0.000)。
2.免疫組化結果顯示,CD56、IL-15、TNF-α在分
8、泌期正常子宮內(nèi)膜與反復種植失敗患者子宮內(nèi)膜腺上皮與基質(zhì)細胞中均有表達,RIF組的平均光密度值顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3. CD56的表達升高對RIF的診斷效能高,且與IL-15和TNF-α的表達均呈正相關(P<0.05)。
結論
1. CD56、IL-15、TNF-α在反復種植失敗分泌期子宮內(nèi)膜比正常內(nèi)膜表達均升高。
2. CD56的表達升高對RIF有診斷價值,且與IL
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