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文檔簡(jiǎn)介
1、前列腺癌(PCa)是男性常見的泌尿系統(tǒng)疾病,具有隱匿性,且多發(fā)現(xiàn)為晚期。近年來,我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率有著明顯上升趨勢(shì)。前列腺癌相關(guān)標(biāo)志物PSA早期篩查以及激肽釋放酶3(KLK3) rs2735839、rs17632542基因多態(tài)性與PCa相關(guān)性研究被廣泛關(guān)注。
本研究以納米納米金磁微粒為載體,分別構(gòu)筑“納米金磁微粒-磁定量免疫層析法”PSA檢測(cè)系統(tǒng)和“PCR-納米金磁微粒層析法”KLK3基因rs2735839、rs176325
2、42檢測(cè)系統(tǒng),分析評(píng)估該檢測(cè)系統(tǒng)的特異性、靈敏度以及穩(wěn)定性,并完成一定量臨床樣本的試驗(yàn)研究,闡明該檢測(cè)系統(tǒng)的有效性及適用性。
主要研究結(jié)果:
1.在納米金磁微粒-PSA磁定量免疫層析法的建立過程中,本研究通過對(duì)納米金磁微粒偶聯(lián)PSA單抗的偶聯(lián)條件、試紙條劃線濃度和噴涂量進(jìn)行優(yōu)化,并對(duì)其進(jìn)行性能評(píng)估實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明該系統(tǒng)通過便攜式磁分析儀實(shí)現(xiàn)PSA的定量檢測(cè),具有較好的重復(fù)性,準(zhǔn)確度和特異性。
2.在基于PCR
3、-納米金磁微粒層析法的KLK3基因rs2735839、rs17632542分型檢測(cè)方法的建立過程中,本實(shí)驗(yàn)通過陽(yáng)性質(zhì)控品的構(gòu)建、特異引物的篩選及反應(yīng)體系的優(yōu)化,實(shí)現(xiàn)了KLK3基因的快速分型檢測(cè),并對(duì)其進(jìn)行與測(cè)序驗(yàn)證,結(jié)果表明二者具有較好的一致性。
3.本研究通過“納米金磁微粒-磁定量免疫層析法”PSA檢測(cè)系統(tǒng)和“PCR-納米金磁微粒層析法”KLK3基因rs2735839、rs17632542檢測(cè)系統(tǒng)分別對(duì)臨床樣本的PSA水平及
4、KLK3基因型進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)其相關(guān)性進(jìn)行初步探討,結(jié)果表明,KLK3rs2735839-G與較高的PSA水平相關(guān)。
以納米金磁微粒為載體,建立的“納米金磁微粒-磁定量免疫層析法”PSA檢測(cè)系統(tǒng)和“PCR-納米金磁微粒層析法”KLK3基因rs2735839、rs17632542檢測(cè)系統(tǒng),具有操作簡(jiǎn)單、快速普適等優(yōu)點(diǎn),不需要昂貴的儀器設(shè)備及專業(yè)的技術(shù)人員,可用于大規(guī)模的臨床篩查,為PSA的早期篩查及KLK3基因分型檢測(cè)提供了一種可
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