耐多藥結核分枝桿菌中耐利福平表型與基因型的研究.pdf

1、目的：了解耐多藥結核分枝桿菌中耐利福平表型與基因型的關系，以及結核分枝桿菌耐利福平機制。
　　方法：對結核病患者臨床標本進行抗酸染色涂片、細菌培養(yǎng)、菌型鑒定及藥敏試驗，篩選耐多藥結核分枝桿菌并獲取其耐藥表型數據。提取菌株DNA，分別對耐利福平相關基因rpoB、rpoC、rpoA及rpoZ基因編碼區(qū)全長進行PCR擴增和測序，獲得菌株耐藥基因型信息。測序結果在NCBI數據庫中與結核分枝桿菌標準菌株H37Rv序列進行比對，并分析結果。<

2、br>　　結果：研究的71例耐多藥結核分枝桿菌菌株中，65例（91.5％）發(fā)生耐利福平相關的基因突變，包括rpoB、rpoC和rpoA多個基因的突變，無rpoZ基因突變，6例無上述4個基因突變。65例突變株均出現rpoB基因突變，其中63例（88.7%）發(fā)生在rpoB基因中利福平耐藥決定區(qū)（RRDR）內，以531（54.9%)、526（14.1%）及516（9.9%)位點突變?yōu)橹鳎?例單獨出現RRDR外基因突變；63例中有7例出現RRD

3、R內與RRDR外聯合突變。65例突變株中，27例（38.0%）發(fā)生rpoC基因突變，3例（4.2%）發(fā)生rpoA基因突變。rpoC及rpoA基因突變的菌株均同時在rpoB基因發(fā)生突變，即雙基因聯合突變。本研究共發(fā)現11種結核分枝桿菌耐利福平相關基因新型突變，包括7種 rpoB基因突變：CCG126TCG、CTG511CCC、TCG574TAC、TCG663GCG、GGC747GAC和GTG250GCG/GTC251TAC聯合突變；4種r