自主神經(jīng)遞質(zhì)在乳鼠心房肌細(xì)胞Ca-L和KAch通道表達(dá)中的作用.pdf

1、目的：
　　探討不同濃度的自主神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素（NE）和乙酰膽堿（Ach））對(duì)乳鼠心房肌細(xì)胞L型鈣離子通道（Ca-L）和乙酰膽堿敏感性鉀通道（KAch）相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響。
　　方法：
　　1天齡SD乳鼠，消化分離獲得心房肌細(xì)胞，培養(yǎng)24h后干預(yù)分組。分為低藥物濃度組、高藥物濃度組。兩藥物濃度組分別按如下方案各自分成5亞組。
　?。?）低濃度組：①對(duì)照組：不予干預(yù)，培養(yǎng)24h。②NE組：NE0.1μmo

2、l/L干預(yù)24h。③Ach組：Ach0.1μmol/L干預(yù)24h。④NE+Ach組：NE0.1μmol/L+Ach0.1μmol/L干預(yù)24h；⑤NE+Meto（美托洛爾）組：NE0.1μmol/L+Meto0.1μmol/L干預(yù)24h。
　?。?）高濃度組：①對(duì)照組：不予干預(yù)，培養(yǎng)72h。②NE組：NE10μmol/L干預(yù)72h。③Ach組：Ach10μmol/L干預(yù)72h。④NE+Ach組：NE10μmol/L+Ach10μm

3、ol/L干預(yù)72h。⑤NE+Meto組：NE10μmol/L+Meto10μmol/L干預(yù)72h。實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR、免疫印跡（WB）檢測(cè)各組Cav1.2、Cav1.3、Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　?。?）低濃度組：給予NE刺激24h后Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào)；Ach刺激24h后Cav1.2、Cav1.

4、3 mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào)，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)；NE+Ach組與NE組比較，Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào)，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)；NE+Ach組與Ach組比較，Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào)；NE+Meto組與NE組比較，Meto干預(yù)后Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào)，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)。
　　

5、（2）高濃度組中：NE、Ach刺激72h后Cav1.2、Cav1.3、Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白均表達(dá)下調(diào)；NE+Ach組分別與NE組、Ach組比較，Kir3.1、Kir3.4蛋白表達(dá)均下調(diào)；NE+Meto組與NE組比較，Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白均表達(dá)上調(diào)，Kir3.1、Kir3.4蛋白表達(dá)下調(diào)。
　　結(jié)論：
　?。?）低濃度NE促進(jìn)培養(yǎng)乳鼠心房肌細(xì)胞Cav1.2、Cav1.3基因和蛋白表達(dá)