宮頸脫落細(xì)胞中HPV感染與Beclin1蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry，ICC）的方法檢測(cè)子宮頸脫落細(xì)胞中人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染情況，同時(shí)檢測(cè)自噬基因Beclin1的表達(dá)水平及研究其相關(guān)性。為經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)的子宮頸癌HPV篩查提供操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低廉的HPV檢測(cè)方法，同時(shí)補(bǔ)充新的有效的輔助篩查指標(biāo)。
　　方法：
　　1500例病例來(lái)源于山西醫(yī)學(xué)科學(xué)院山西大醫(yī)院婦產(chǎn)科門診就診者及

2、收住院患者，收集時(shí)間為2014年5月至11月；患者年齡范圍為21-65歲，且既往均無(wú)宮頸病變史，首先從子宮頸移行帶區(qū)刷取1份脫落細(xì)胞樣本，進(jìn)行液基薄層細(xì)胞學(xué)（Liquid thin-layer cytology test，LCT）檢測(cè)，再?gòu)膶m頸管處刷取1份宮頸分泌物標(biāo)本進(jìn)行雜交捕獲第二代（HC II）法檢測(cè)HPV感染。再利用液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)后的樣本殘液，進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)HPV感染情況；同時(shí)檢測(cè)Beclin1的蛋白表達(dá)水平，對(duì)所有

3、細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果為不明確意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）及以上患者行陰道鏡活檢。詳細(xì)記錄以上各組受試者的檢查結(jié)果。將以上各種檢測(cè)結(jié)果核對(duì)后錄入SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較，驗(yàn)證ICC法檢測(cè)HPV感染情況及Beclin1蛋白表達(dá)這一輔助指標(biāo)的臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　結(jié)果：
　　1.1500例患者中，LCT異常者210例(14.0％)，HC II法檢測(cè)HPV感染者190例(12.7%)，LCT異常者中用HC II法檢測(cè)HPV感

4、染者140例（66.7%），ICC法檢測(cè)HPV感染者95例（45.2%），兩種檢測(cè)方法應(yīng)用卡方檢驗(yàn)（?2=85.95，P<0.05）；靈敏度：47.4％；特異度：75.0％。2.正常子宮頸上皮，子宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasis CIN）I級(jí)，子宮頸上皮內(nèi)瘤變II-III級(jí)的子宮頸管脫落細(xì)胞中Beclinl蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為56.0%（56/100例）、49.1%（28/57例）、2

5、0.0%（3/15例）。兩個(gè)獨(dú)立樣本卡方檢驗(yàn)顯示正常子宮頸與CIN I級(jí)的子宮頸脫落細(xì)胞中Beclinl的表達(dá)無(wú)顯著性差異(?2=0.690，P>0.05)；而正常子宮頸、子宮頸上皮內(nèi)瘤變I級(jí)與子宮頸上皮內(nèi)瘤變 II-III級(jí)分別比較，則Beclinl蛋白表達(dá)差異有顯著性(?2=6.765， P=0.009；?2=4.108，P=0.043)。3. HPV感染與Beclin1蛋白表達(dá)的關(guān)系，卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示：?2=20.198，P<0.

6、05，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：總體卡方檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且隨著HPV病毒負(fù)荷量值增加，Beclin1蛋白表達(dá)呈下降趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　　應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法檢測(cè)宮頸脫落細(xì)胞中HPV感染情況，可作為農(nóng)村地區(qū)宮頸癌篩查中HPV檢測(cè)方法的選擇，該檢測(cè)方法敏感度近50.0％，特異度達(dá)75.0％；并且能夠通過(guò)一份樣本的檢測(cè)，獲取細(xì)胞學(xué)檢測(cè)和HPV病毒感染兩項(xiàng)信息，對(duì)于經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)的宮頸癌篩查有一定的應(yīng)用價(jià)值。2.宮頸癌癌前病變中，高級(jí)別病