GRP78在糖尿病大鼠逼尿肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)探討GRP78在糖尿病大鼠逼尿肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激病變發(fā)生發(fā)展，特別是逼尿肌細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用和機(jī)制，揭示GRP78在糖尿病大鼠逼尿肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激病變發(fā)生發(fā)展中的動(dòng)態(tài)演變規(guī)律變化，為DCP的病因?qū)W研究提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　在本研究中，我們選取GRP78作為ERS的標(biāo)志性因子，取健康清潔級(jí)成年雌性Sprague-Dawley大鼠50只隨機(jī)平均分為4組糖尿病組和1組正常對(duì)照組。糖尿病組采用一

2、次注射法經(jīng)腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）50 mg/k g,注射后72小時(shí)行鼠尾靜脈血糖濃度＞16.7 mmo l/L為模型成功。分別在4周、8周、12周、16周處死大鼠，切除膀胱組織，并去除周圍脂肪和結(jié)締組織，分別采用tunel法測(cè)定逼尿肌細(xì)胞凋亡率和電鏡下觀察逼尿肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)學(xué)變化。用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)及Western-Blot技術(shù)動(dòng)態(tài)研究糖尿病大鼠逼尿肌細(xì)胞凋亡水平與GRP78表達(dá)情況的相互關(guān)系，并進(jìn)行所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。<

3、br>　　結(jié)果：
　　糖尿病大鼠造模成功即出現(xiàn)多飲、多食、排尿增多，體型明顯消瘦，毛發(fā)變黃變硬，光澤度下降，出現(xiàn)嗜睡對(duì)外界條件反應(yīng)遲鈍，個(gè)別糖尿病大鼠四肢潰爛，對(duì)疼痛不敏感，對(duì)照組大鼠飲食狀況正常；糖尿病各組凋亡率隨著時(shí)間的遞增而升高,12w時(shí)升高趨勢(shì)明顯，凋亡趨勢(shì)呈時(shí)間依賴性；在電鏡下糖尿病組逼尿肌細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞核周圍大量?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)無(wú)序排列，體積增大，為白色不規(guī)則空泡樣結(jié)構(gòu)，漿膜附著核糖小體；RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,4w組和8

4、w組明顯高于對(duì)照組，12w組表達(dá)水平最高，是對(duì)照組的8.87倍，而16w組表達(dá)水平較12w有所下降。Western–blot檢測(cè)結(jié)果顯示，GRP78蛋白表達(dá)水平4w組較對(duì)照組出現(xiàn)升高，8w組表達(dá)水平最高，是對(duì)照組的1.45倍，而12w組和16w組較8w組明顯下降。
　　結(jié)論：
　　DCP逼尿肌細(xì)胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激密切相關(guān)，其中GRP78表達(dá)水平的改變是至逼尿肌細(xì)胞凋亡的重要病變機(jī)制，隨著糖尿病病程的進(jìn)展，GRP78與DCP有