PPARα-PGC1-α-AKT信號通路在低劑量TFA對大鼠心肌組織損傷中的作用.pdf

1、目的：反式脂肪酸（TFA）是含有反式構(gòu)型雙鍵的不飽和脂肪酸的總稱，主要來源包括反芻動物體內(nèi)合成、植物油精煉和油脂氫化過程。氫化油脂具有熔點高、氧化穩(wěn)定性好、貨架期長、口感宜人等特點，被廣泛用于食品加工中，我國居民TFA的攝入量也呈現(xiàn)逐年上升趨勢。20世紀70年代的研究發(fā)現(xiàn)，心血管疾病與食用氫化脂肪有關(guān)。之后大量研究證實了TFA可導(dǎo)致血栓形成、炎癥反應(yīng)、動脈硬化，大腦功能衰退、致癌性，誘發(fā)Ⅱ型糖尿病、冠心病等。目前國內(nèi)外關(guān)于反式脂肪酸誘發(fā)

2、心血管疾病的研究雖然較多，但其分子機制尚不清楚。尤為重要的是，已報導(dǎo)的研究中多是高濃度TFA對機體健康的影響，關(guān)于低劑量TFA的研究甚少，因此，為了進一步探討低濃度TFA對心血管系統(tǒng)影響的分子機制，我們進行了如下研究。
　　方法：健康清潔級SD大鼠48只，雌雄各半，體重180g左右，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，測基礎(chǔ)血壓，遵從隨機、均衡原則，采用查閱隨機數(shù)字表法將其分為對照組（ND）、1％TFA組（LTD）、4%TFA組（HTD）共3組，每組

3、16只，雌雄分籠，飼養(yǎng)12周。實驗期間每周記錄動物的進食及體重變化，在0、6和12周時分別測量大鼠的血壓值。喂養(yǎng)12周后，禁食12h，不禁水，稱重，斷頭處死，收集的血液放入非抗凝管中，室溫靜置20min，4000r/min離心15min分離血清，-80℃保存。全自動生化分析儀檢測各組大鼠血清血脂指標。分離出大鼠的心臟組織，其中每組6只用于做病理學(xué)切片，觀察心臟形態(tài)學(xué)變化，余下心臟組織做如下檢測：按試劑盒操作說明書測定大鼠心臟組織SOD的

4、活力及MDA的含量；Western blot法測定大鼠心臟組織PGC1-α、PPARα、AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax蛋白的表達量。數(shù)據(jù)以X±SD表示，多組間比較采用SPSS21軟件對數(shù)據(jù)進行 One-way ANOVA檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.TFA對大鼠體重、進食量、血壓的影響
　　12周雌雄各組大鼠體重均無差異（P>0.05）；雌雄各組進食量及每周體重隨年齡增加均有所增加

5、，但各組間無差異（P>0.05）；0、6、12周時各組大鼠血壓亦無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　2.TFA對大鼠血脂的影響
　　LTD和HTD組大鼠TG水平明顯高于ND組（P＜0.05）；HTD組大鼠LDL水平明顯高于ND組（P＜0.05）。其他各組之間比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　3.TFA對大鼠心肌組織PPARα/PGC1-α/AKT/p-AKT的影響
　　Western blot結(jié)果顯示，與

6、ND組相比，LTD和HTD組大鼠心臟組織中PPARα、PGC1-α蛋白表達均明顯降低（P＜0.05)，p-AKT/AKT的比值明顯下降（P>0.05）。
　　4.TFA對大鼠心臟組織氧化應(yīng)激的影響
　　與ND組相比，LTD和HTD組大鼠心臟組織MDA含量明顯增加， SOD活性顯著降低（P＜0.05），表明反式脂肪酸可誘導(dǎo)大鼠心肌組織氧化應(yīng)激。
　　5.大鼠心臟病理學(xué)改變
　　HE染色結(jié)果顯示，ND組大鼠心臟組織心

7、肌細胞形態(tài)正常，排列整齊。LTD和HTD組均可見炎細胞浸潤，但兩組間沒有明顯區(qū)別。
　　6.TFA對大鼠心肌組織凋亡的影響
　　與ND組相比，LTD和HTD組大鼠心臟組織中Bcl-2蛋白的表達明顯降低（P＜0.05）, Bax蛋白的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），Bcl-2/Bax比值明顯降低（P＜0.05），說明反式脂肪酸可誘導(dǎo)大鼠心肌組織細胞凋亡。
　　結(jié)論：低劑量反式脂肪酸可通過PPARα/PGC1-α/A