不同抗原表位CART-30細(xì)胞對經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤細(xì)胞株的殺傷作用及優(yōu)化研究.pdf

1、經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin's lymphoma，cHL)是霍奇金淋巴瘤的病理類型之一，是起源于淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要發(fā)生于年輕及老年患者。目前常規(guī)化療療效較好，但難治/復(fù)發(fā)型cHL仍缺少有效的治療方法，因此如何減少并發(fā)癥、優(yōu)化、個體化治療成為目前研究重點。嵌合抗原受體修飾的T細(xì)胞（chimeric antigen receptor-modified T cell，CART）是近年來迅速發(fā)展的免疫治療領(lǐng)

2、域的研究熱點。目前靶向性針對CD30-CART細(xì)胞免疫治療在我院臨床治療工作中已收獲一定成就，但療效仍待進一步優(yōu)化。
　　目的：本研究選擇不同抗原表位的兩種單克隆抗體Ki-4及Ber-H2，優(yōu)化性構(gòu)建不同的CAR基因片段的載體，比較兩種CART細(xì)胞對CD30陽性的cHL細(xì)胞系L428的殺傷作用，以及其機制與NF-κB信號通路相關(guān)性進行研究。
　　方法：①構(gòu)建攜帶不同抗原表位的CD30-CAR基因片段的慢病毒載體;②兩種不同抗

3、原表位的CART-30細(xì)胞的培養(yǎng);③兩種不同抗原表位CART-30細(xì)胞對cHL細(xì)胞株的殺傷效率的比較;④CD30-CARs對cHL細(xì)胞株NF-κB機制的影響。
　　結(jié)果：①成功構(gòu)建出不同抗原表位的CD30-CART細(xì)胞，陽性率平均值約為65.7％左右;②Ki-4組效靶比為1∶1時殺傷效率的平均值為35.15％，效靶比為10∶1時殺傷效率的平均值為66.99％;Ber-H2組效靶比為1∶1時殺傷效率的平均值為31.95％，效靶比為1

4、0∶1時殺傷效率的平均值為56.11％;CD19組效靶比為1∶1時殺傷效率的平均值為21.92％，效靶比為10∶1時殺傷效率的平均值為45.49％;CIK組效靶比為1∶1時殺傷效率的平均值為16.99％，效靶比為10∶1時殺傷效率的平均值為32.22％。P＜0.05，不同效應(yīng)細(xì)胞間及不同效靶比間的殺傷效應(yīng)均有差異，且此差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。③Wester蛋白印跡法結(jié)果示：TNF-α組及Ki-42h及3h組P-P65呈強陽性，IκBα蛋白呈