雷帕霉素對X-射線誘導(dǎo)的大腦皮質(zhì)發(fā)育畸形大鼠老年期認(rèn)知功能及行為學(xué)的影響.pdf

1、目的：探討雷帕霉素（RAP）對 X-射線宮內(nèi)照射誘導(dǎo)大腦皮質(zhì)發(fā)育畸形（MCD）模型大鼠老年期認(rèn)知損害及行為學(xué)的影響，為進(jìn)一步研究 MCD的發(fā)病機(jī)制及早期干預(yù)、治療打下基礎(chǔ)。
　　方法：①將6只健康妊娠17天的SD（E17）大鼠隨機(jī)分配為3組，即正常組、二甲基亞砜（DMSO）注射的175cGy X-射線照射組（DMSO組）、RAP治療的175cGy射線照射組（RAP組）各2只，各孕鼠所生鼠一代（F1）飼養(yǎng)至老年期（滿18月齡）后作為

2、實驗對象；②行為學(xué)觀察：采用視頻監(jiān)控自然光線下進(jìn)行連續(xù)24小時錄像，對治療前、治療中、及治療后期間監(jiān)控，持續(xù)3月，抽取其中30天，每天抽取10小時，人工觀察分析大鼠活動、飲水、攝食、晝夜節(jié)律及是否有自發(fā)性癲癇發(fā)作等；③水迷宮實驗：通過Morris水迷宮（MWM）測定大鼠藥物治療前后的定位航行及空間探索實驗，比較大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化。④實驗動物于實驗終止后或死亡后取腦組織，觀察大鼠腦大體標(biāo)本，進(jìn)行巨檢標(biāo)本采圖，對腦組織分別進(jìn)行冰凍切

3、片，行Nissl染色分析。
　　結(jié)果：①行為學(xué)觀察：藥物治療前、治療中及治療后三月期間，老年大鼠活動性較青年均減少，正常組無自發(fā)性癲癇發(fā)作，MCD大鼠較正常組夜間活動多（洗臉、舔毛、搔癢等動作較多，追逐、打架行為頻繁）。隨著鼠齡的增加，活動逐漸減少，行動變緩等情況。治療前，DMSO組、RAP組≤2級（Racine分級）的癲癇發(fā)作次數(shù)較正常組多，藥物治療后RAP組癲癇發(fā)作次數(shù)減，整個實驗過程中未見典型的Racine分級三級及其以上的

4、自發(fā)性癲癇發(fā)作。②MWM藥物治療前定位航行實驗：3組大鼠隨著訓(xùn)練天數(shù)的增加，逃避潛伏期逐漸縮短，DMSO組、RAP素組逃避潛伏期較正常組延長，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05），DMSO組與RAP組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；藥物治療后：DMSO組、RAP組逃避潛伏期仍較正常組延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。DMSO組與RAP組相比，逃避潛伏期無明顯差異，藥物治療后各組逃避潛伏期與藥物治療前比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。空間探索測定：藥物治療

5、前 DMSO組、RAP組穿越平臺次數(shù)、目標(biāo)象限時間比明顯少于正常組（p＜0.05），DMSO組與RAP組比較無差異；藥物治療后 RAP組、DMSO組目標(biāo)象限時間比、穿越平臺次數(shù)較正常組減少（p＜0.05），RAP組與DMSO組比較無差異。正常組、DMSO組、RAP組治療后與治療前比較無差異。③大體標(biāo)本及病理學(xué)分析：DMSO組、RAP組腦體積較正常組減小，以大腦半球縮小明顯，四疊體暴露。冠狀切面觀察：胼胝體可見缺失，皮質(zhì)變薄；切片過程中，

6、3組均可見腦組織多發(fā)白色鈣化點，主要分布于白質(zhì)。Nissl染色：DMSO組、RAP組大鼠與正常組比較六層皮質(zhì)變薄，皮質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂，縱向、橫向皮質(zhì)層次分界模糊，細(xì)胞排列紊亂、稀疏，皮質(zhì)內(nèi)及皮質(zhì)下組織可見大小不等的神經(jīng)元異位結(jié)節(jié)。RAP組、DMSO組可見海馬結(jié)構(gòu)異常，連續(xù)性中斷，CA1、CA2區(qū)可見數(shù)量、大小不等的異位結(jié)節(jié)。海馬結(jié)構(gòu)可見神經(jīng)元分散現(xiàn)象。根據(jù)FCD分級：RAP組、DMSO組均可見有皮層異位結(jié)節(jié)，胼胝體缺失、海馬異常，F(xiàn)CD分型為