轉錄因子E2F1通過SRC3調節(jié)樹突狀細胞成熟機制的研究.pdf

1、作為免疫系統(tǒng)中最重要的抗原遞呈細胞，樹突狀細胞起到起始適應性免疫應答并連接固有免疫應及適應性免疫應答的作用。樹突狀細胞的成熟和活化，需要多個信號通路和轉錄因子的協調，目前發(fā)現和報道的大部分研究集中于樹突狀細胞成熟和分化的正向調控。我們實驗室前期研究觀察到E2F1負調控樹突狀細胞成熟，提示了一個樹突狀細胞可能的反饋調節(jié)通路。為此，該研究擬深入探討和揭示E2F1反饋調節(jié)樹突狀細胞成熟和分化的可能分子機制。
　　 SRC3是細胞代謝中

2、重要的共激活因子，以往曾有報導SRC3是E2F1的調控基因。另外報導還發(fā)現，SRC3敲除小鼠中淋巴瘤發(fā)病率提高，提示其可能參與免疫細胞的成熟以及分化。
　　 本研究中，在對敲低E2F1的DC2.4細胞中檢測發(fā)現，SRC3的表達水平下調;而在E2F1過表達細胞中，SRC3的表達水平也隨著E2F1的高表達上調。上述實驗結果提示SRC3可能是E2F1的靶基因。深入研究進一步發(fā)現，改變SRC3表達時，引起了包括AKT及p38等多條與樹突

3、狀細胞成熟相關的信號通路的變化，同時部分樹突狀細胞表面受體也發(fā)生了顯著的變化。實驗結果提示E2F1可能通過轉錄調節(jié)SRC3，負調控樹突狀細胞成熟。為進一步揭示轉錄因子E2F1對SRC3的轉錄調控機制，對SRC3啟動子序列進行分析，發(fā)現其中含有多個E2F1和Sp1潛在靶位點。在DC2.4細胞中敲低Sp1，檢測證實Sp1可負調控SRC3。目前已構建了含有SRC3啟動子序列上游-600-+58片度的報告基因質粒以及一系列截短質粒，細致地研究E